【摘 要】
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探讨用携带有人BMP 2基因片段的复制缺陷重组腺病毒 (Ad BMP 2 )转染对体外培养MSCs成骨转化的影响。取日本大耳白兔 2 0只自双侧股骨大转子取材培养MSCs,左侧来源细胞为实验
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探讨用携带有人BMP 2基因片段的复制缺陷重组腺病毒 (Ad BMP 2 )转染对体外培养MSCs成骨转化的影响。取日本大耳白兔 2 0只自双侧股骨大转子取材培养MSCs,左侧来源细胞为实验组 ,右侧为对照组。以复制缺陷重组腺病毒介导人BMP 2基因转染MSCs后用RT PCR法及免疫组化染色证实转基因MSCs的BMP 2蛋白表达情况 ,通过改良Gomori钙钴法及ALP检测试剂盒检测两组细胞的ALP活性 ;通过RT PCR及Westernblot检测两组细胞Ⅰ型胶原的表达 ;通过BGP放免分析试剂盒检测两组细胞的OCN含量 ;并通过透射电镜观察转基因前后MSCs超微结构的变化。实验证实用Ad BMP 2转染的MSCs具有成骨细胞的结构特征和生物学特性。定量分析显示转基因组MSCs培养上清中ALP活性为 ( 7 0 1± 0 5 9)U L ,对照组为 ( 5 2 3± 0 5 5 )U L。Ⅰ型胶原表达的半定量分析显示转基因组为 1 3 5± 0 12 ,对照组为 3 65± 0 3 7。OCN含量在转基因组为 ( 2 4 5 0± 0 93 ) μg L ,对照组为 ( 15 45± 1 81) μg L。认为Ad BMP 2转染可以提高MSCs的体外成骨能力
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