【摘 要】
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目的 探讨半夏泻心汤对胃癌细胞来源外泌体诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖、迁移、侵袭的影响.方法 荧光染料1,1\'-双十八烷基-3,3,3\',3\'-四甲基吲哚羰花青高氯酸盐(Dil)标记胃癌细胞来源外泌体,制备半夏泻心汤含药血清.实验分为空白组,模型组,半夏泻心汤低、中、高剂量组及Shh阻断剂组,各组上室加入BMSCs细胞悬液,下室加入无外泌体血清的培养基,除空白组外其他各组下室加入胃癌细胞来源外泌体,模型组及空白组上室加入含10％正常对照血清,半夏泻心汤低、中、高剂量组上室内加入
【机 构】
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甘肃中医药大学基础医学院,甘肃兰州730000;甘肃中医药大学中医临床医学院,甘肃兰州730000
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目的 探讨半夏泻心汤对胃癌细胞来源外泌体诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖、迁移、侵袭的影响.方法 荧光染料1,1\'-双十八烷基-3,3,3\',3\'-四甲基吲哚羰花青高氯酸盐(Dil)标记胃癌细胞来源外泌体,制备半夏泻心汤含药血清.实验分为空白组,模型组,半夏泻心汤低、中、高剂量组及Shh阻断剂组,各组上室加入BMSCs细胞悬液,下室加入无外泌体血清的培养基,除空白组外其他各组下室加入胃癌细胞来源外泌体,模型组及空白组上室加入含10％正常对照血清,半夏泻心汤低、中、高剂量组上室内加入含10％半夏泻心汤低、中、高剂量含药血清,Shh阻断剂组上室加入含20 μmol/L GANT61(Shh信号通路阻断剂)的10％空白血清.激光共聚焦显微镜观察BMSCs对胃癌细胞来源外泌体的摄取,MTT法检测各组BMSCs增殖率,Transwell小室检测BMSCs迁移、侵袭能力,Western blot检测Shh、Ptch1、Smo、Gli1、c-Myc蛋白表达.结果 与空白组比较,模型组BMSCs内红色荧光标记平均光密度值(MOD)、细胞增殖率、细胞迁移、侵袭能力及Shh、Ptch1、Smo、Gli1、c-Myc蛋白表达升高(P＜0.05),半夏泻心汤各剂量组各指标均下降,以高剂量组更明显(P＜0.05).结论 半夏泻心汤可干预BMSCs对胃癌细胞来源外泌体的摄取,下调c-Myc蛋白及Shh信号通路Shh、Ptch1、Smo、Gli1蛋白表达,抑制胃癌细胞来源外泌体诱导的BMSCs增殖、迁移、侵袭.
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目的 建立UPLC法同时测定双黄升白复方(黄芪、黄精、女贞子等)中蕊异黄酮葡萄糖苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝霍苷Ⅰ、红景天苷、新北美圣草苷、柚皮苷、特女贞苷、芒柄花黄素的含量.方法 该药物50％甲醇提取液的分析采用Aglient Eclipse Plus C18 RRHD色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8 μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;检测波长254、270、280 nm.结果 11种成分在各自范围内线性关系良好(r＞0.999 6),平均加样回
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