【摘 要】
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目的 探讨玻璃化冻存组织工程肌腱植入大鼠体内修复跟腱缺损后不同时期,大鼠的免疫排斥反应及对肝、肾、心血管功能的影响. 方法 抽取1周龄SD大鼠尾腱,采用组织块法培养肌腱
【机 构】
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四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室·干细胞与组织工程研究室,成都,610041;四川省疾病预防控制中心毒理研究所
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目的 探讨玻璃化冻存组织工程肌腱植入大鼠体内修复跟腱缺损后不同时期,大鼠的免疫排斥反应及对肝、肾、心血管功能的影响. 方法 抽取1周龄SD大鼠尾腱,采用组织块法培养肌腱细胞.取第2～4代肌腱细胞,以5×106个/mL细胞密度接种至长1.5 cm生物衍生肌腱材料,复合培养构建组织工程肌腱.采用21%DMSO作为玻璃化冻存保护液,Eurocollins solution作为4℃条件下预冷液和洗脱液的基础液体,按自制的玻璃化冻存方法冻存.健康SD大鼠72只,雌雄不限,体重210～230 g.随机分成A(n=32)、B(n=32)、C(n=8)3组.A、B组实验动物于跟腱中段制备长约0.5 cm肌腱缺损模型,分别将玻璃化冻存后及未冻存的组织工程肌腱移植修复缺损肌腱:C组大鼠未手术,为正常对照.术后2、4、6、8周,行大体观察、肝、肾及心血管功能检测;术后2、4、6周行血清免疫学检测. 结果 A、B组植入部位均未见组织坏死、积液及化脓感染:术后2周,A、B组均出现粘连现象,4～6周逐渐好转,8周未见明显粘连,新生组织连续性完整,肌腱桥接部已愈合,与正常肌腱类似.术后2、4、6周,血清中IgG和IgM含量A、B、C组组间比较差异均无统计学意义(P>0.05).肝功能检测:A组术后4周,B组术后4、6周,谷草转氨酶均低于C组,差异有统计学意义(P0.05).各时间点A、B组谷丙转氨酶、ALP、直接胆红素和总胆红素与C组比较差异均无统计学意义(P>0.05).肾功能检测:术后2周,A组血清白蛋白和B组肌酐明显下降,与C组比较差异均有统计学意义(P0.05).心血管功能检测:A组各时间点血糖、甘油三酯、胆固醇与C组比较差异均无统计学意义(P>0.05):B组术后8周甘油三酯与C组比较差异有统计学意义(P<0.05). 结论 玻璃化冻存的组织工程肌腱植入大鼠体内修复跟腱缺损,未引起明显免疫排斥反应,对肝、肾及心血管功能无明显影响.
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