【摘 要】
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目的 探究miR-27a-3p减轻大鼠脑出血（intracerebral hemorrhage,ICH）引起的脑损伤的分子机制。方法 将36只建模成功的SD大鼠随机分为模型组、miR-27a-3p干预组（miR-27a-3p组）和miR-27a-3p+pcDNA3.1-EGFR干预组（pcEGFR组）,每组12只;另取12只健康SD大鼠作为假手术组。通过自体尾动脉血注入法构建ICH大鼠模型,假手术
【基金项目】
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陕西省自然科学基础研究计划项目（2022JM-594）；
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目的 探究miR-27a-3p减轻大鼠脑出血（intracerebral hemorrhage,ICH）引起的脑损伤的分子机制。方法 将36只建模成功的SD大鼠随机分为模型组、miR-27a-3p干预组（miR-27a-3p组）和miR-27a-3p+pcDNA3.1-EGFR干预组（pcEGFR组）,每组12只;另取12只健康SD大鼠作为假手术组。通过自体尾动脉血注入法构建ICH大鼠模型,假手术组健康SD大鼠只进针不注血,miR-27a-3p组ICH大鼠转染miR-27a-3p,pcEGFR组ICH大鼠转染miR-27a-3p+pcDNA3.1-EGFR。采用定量实时聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测大鼠脑组织或血清中表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）的mRNA和miR-27a-3p的相对表达情况;采用Western blotting分析Occludin、Claudin-5和EGFR蛋白表达水平。采用免疫荧光染色对过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）阳性细胞进行定量分析;使用TUNEL染色分析血肿周围区域的细胞凋亡情况;通过免疫组织化学方法分析大鼠脑组织OX-42的蛋白表达情况。结果 与假手术组比较,模型组大鼠血清中miR-27a-3p水平降低（P＜0.001）;血肿周围组织中miR-27a-3p水平降低（P ＜0.01）。与模型组比较,miR-27a-3p组大鼠的Occludin和Claudin-5蛋白表达水平升高（P＜0.05）。与假手术组比较,模型组大鼠TUNEL阳性凋亡神经元数量、MPO阳性细胞数量和血肿周围区域OX-42阳性细胞数量均升高（P＜0.01）;与模型组比较,miR-27a-3p组大鼠TUNEL阳性凋亡神经元数量、MPO阳性细胞数量和血肿周围区域OX-42阳性细胞数量均降低（P＜0.05）。qRT-PCR和脑含水量检测结果显示,与模型组比较,miR-27a-3p组大鼠EGFR的mRNA表达水平和脑含水量均降低（P＜0.05）;与miR-27a-3p组比较,pcEGFR组大鼠EGFR的mRNA表达水平和脑含水量均升高（P＜0.05）。结论 miR-27a-3p可显著减轻ICH诱导的脑水肿、白细胞浸润和神经元凋亡。外源性miR-27a-3p可能通过靶向紧密连接复合物和EGFR蛋白维持血脑屏障正常生理功能。
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