【摘 要】
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目的 探讨钙网蛋白(calreticulin,CALR)基因下调对肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)凋亡及内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)通路的影响.方法 脂质体法将C
【机 构】
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063210 河北唐山,华北理工大学公共卫生学院;300202 天津,天津医科大学第二医院
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目的 探讨钙网蛋白(calreticulin,CALR)基因下调对肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)凋亡及内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)通路的影响.方法 脂质体法将CALR的小干扰RNA(siRNA)转染至HSC中,24 h后加入促纤维化因子TGF-β1继续作用24 h,倒置显微镜下观察细胞形态,TUNEL法检测细胞凋亡,激光共聚焦显微镜检测细胞内Ca2+水平,Western blot法测定细胞内CALR、GRP78、Caspase-12、Caspase-3蛋白表达水平.结果 相较于对照组和阴性siRNA组,CALR-siRNA组细胞凋亡率显著升高(P＜0.05),Ca2+浓度、GRP78、Caspase-12、Caspase-3蛋白表达水平随CALR蛋白表达降低而升高(P＜0.05).在转染后向细胞中加入TGF-β1,较CALR-siRNA组而言,细胞凋亡率明显降低,凋亡细胞数减少,Ca2+浓度降低,上述蛋白表达也出现了明显逆转.结论 干扰CALR基因表达可以促进HSC凋亡,其机制可能与其引起细胞内Ca2+稳态失调,激活ERS通路有关.
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