简单异尖线虫D-天冬氨酸蛋白酶基因的克隆和表达

来源 :中国寄生虫学与寄生虫病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:madywu
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目的克隆简单异尖线虫Ⅲ期幼虫(L3)的D-天冬氨酸蛋白酶基因(AsAP)全长,研究其表达蛋白的特性。方法根据GenBank中简单异尖线虫D-天冬氨酸蛋白酶基因表达序列标签的部分信息,设计特异引物并用cDNA末端快速扩增技术得到AsAP全长序列,分析推导的蛋白序列特征,并预测其三级结构。用RT-PCR扩增简单异尖线虫k的AsAP基因编码序列,产物用&oR1和SalⅠ双酶切,连入表达载体pET32a(+),转化大肠埃希菌(Ecoli)BL21(DE3),以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达
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