【摘 要】
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目的 研究EFNB2对膀胱癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移等生物学功能的影响,探讨其作为免疫治疗的可能性.方法 以膀胱癌细胞系T24、5637、J82和UM-UC-3细胞为研究对象,选用人膀胱上皮永生化细胞系SV-HUC-1细胞作为阴性对照.通过慢病毒载体转染shRNA-EFNB2进行敲低实验,然后分别采用qRT-PCR和Western blot检测细胞中EFNB2的mRNA和蛋白表达水平;CCK8和克隆形成实验检测细胞增殖活力;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率;Transwell和细胞划痕实验检测细胞侵袭
【机 构】
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400065,重庆医科大学附属第二医院泌尿肾病中心
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目的 研究EFNB2对膀胱癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移等生物学功能的影响,探讨其作为免疫治疗的可能性.方法 以膀胱癌细胞系T24、5637、J82和UM-UC-3细胞为研究对象,选用人膀胱上皮永生化细胞系SV-HUC-1细胞作为阴性对照.通过慢病毒载体转染shRNA-EFNB2进行敲低实验,然后分别采用qRT-PCR和Western blot检测细胞中EFNB2的mRNA和蛋白表达水平;CCK8和克隆形成实验检测细胞增殖活力;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率;Transwell和细胞划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力;Western blot检测Bcl2、Bax、Vimentin和E-cadherin的蛋白表达水平.结果 与人膀胱上皮永生化细胞系SV-HUC-1细胞相比,膀胱癌细胞系中EFNB2的表达水平显著增高,其中以T24细胞表达最高(P＜0.01).敲低T24细胞系EFNB2基因表达后,T24细胞增殖活力显著下降(P＜0.05);细胞周期虽然尚未有显著变化,但细胞凋亡率显著增高(P＜0.05),并且抗凋亡蛋白Bcl2表达显著下降(P＜0.05),促凋亡蛋白Bax表达显著升高(P＜0.01);T24细胞侵袭(P＜0.05)和迁移(P＜0.05)能力均显著下调,并且对EMT有抑制作用的分子E-cadherin表达升高而促进EMT的分子Vimentin表达则下降,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 EFNB2在膀胱癌细胞系T24细胞的增殖、侵袭和迁移等生物学功能中发挥重要作用,为膀胱癌免疫治疗的潜在靶标.
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