探讨线粒体通透性转换孔(mPTP)在心肌细胞胆碱能抗炎通路中的作用。
方法乳鼠心肌细胞培养72 h后，采用随机数字表法将其分为5组(n＝36)：空白对照组(C组)、缺氧复氧组(A/R组)、特异性α7烟碱型乙酰胆碱受体激动剂PNU282987组(P组)、mPTP开放剂苍术苷组(ATR组)和PNU282987＋ATR组(P＋A组)。采用不含血清的低糖DMEM，置于厌氧培养盒中(O2浓度<0.1%)缺氧6 h后，更换为含10%胎牛血清的高糖培养基，置于37 ℃、常氧、5% CO2培养箱中复氧6 h，以制备缺氧复氧损伤模型。P组和ATR组于复氧即刻，分别在培养基中加PNU282987(终浓度为30 μmol/L)和苍术苷(终浓度为20 μmol/L)。P＋A组于复氧即刻在培养基中加入PNU282987(终浓度30 μmol/L)和苍术苷(终浓度20 μmol/L)。于复氧6 h时测定心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、凋亡率、NF-κB p65和磷酸化NF-κB p65 Ser536(p-NF-κB p65 Ser536)表达水平、培养液IL-6和TNF-α的浓度和线粒体膜电位。
结果与C组相比，A/R组、P组、ATR组和P＋A组LDH漏出率、早期和晚期细胞凋亡率升高，培养液IL-6和TNF-α浓度升高，心肌细胞NF-κB p65和p-NF-κB p65 Ser536表达上调，线粒体膜电位降低(P<0.01)；与A/R组相比，P组LDH漏出率和早期细胞凋亡率降低，培养液IL-6和TNF-α浓度降低，心肌细胞p-NF-κB p65 Ser536表达下调，线粒体膜电位升高，ATR组LDH漏出率和早期细胞凋亡率升高，培养液IL-6和TNF-α浓度升高，心肌细胞p-NF-κB p65 Ser536表达上调，线粒体膜电位降低，P＋A组早期细胞凋亡率降低，培养液IL-6和TNF-α浓度降低，心肌细胞p-NF-κBp65 Ser536表达下调(P<0.05或0.01)，LDH漏出率、晚期细胞凋亡率和线粒体膜电位差异无统计学意义(P>0.05)；与P组相比，P＋A组LDH漏出率和晚期细胞凋亡率升高，培养液IL-6和TNF-α浓度升高，心肌细胞p-NF-κBp65Ser536表达上调，线粒体膜电位降低(P<0.05)。
结论胆碱能抗炎通路通过抑制mPTP开放产生抗炎作用，从而减轻心肌细胞缺氧复氧损伤。