Jaridonin耗竭谷胱甘肽诱导DNA损伤致食管癌细胞凋亡

• 作 者: 马永成 苏楠 赵宁民 秦玉花 赵红卫 李巧艳 段虹飞 刘宏民
• 机 构: 450003郑州，河南省人民医院药学部临床药理室,450003郑州，河南省人民医院药学部临床药理室,450003郑州，河南省人民医院药学部临床药理室,450003郑州，河南省人民医院药学部临床药理室,
• 发表日期: 2015年37期
• 关键词: 食管肿瘤 DNA损伤 谷胱甘肽 活性氧 细胞凋亡 对映贝壳杉烷型二萜化合物

目的

探讨Jaridonin诱导食管癌细胞凋亡的作用机制。

方法

采用单细胞凝胶电泳法检测DNA损伤。Western blot法检测p53蛋白的表达。谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒检测细胞内还原性GSH水平。采用氧化还原敏感探针2′，7′–二氯荧光素二乙酸酯和二氢乙锭染色，荧光显微镜和流式细胞仪分别检测细胞内过氧化氢(H₂O₂)和超氧阴离子(O^2.–)水平。

结果

20、40 μmol/L Jaridonin处理组的Olive尾矩值分别为45.2±8.1和89.0±14.2，与对照组(3.2±2.3)比较，差异均有统计学意义(均P<0.01)。Jaridonin处理EC–1细胞2 h时，p53表达开始上调，且随作用时间延长，p53表达水平升高。siRNA干扰p53表达后，EC–1细胞对Jaridonin表现出明显的抗性，细胞凋亡率由转染前的38.5%下降为转染后的8.8%。Jaridonin作用EC–1细胞后，H₂O₂水平显著升高，O^2.–水平无明显变化。20 μmol/L Jaridonin作用EC–1细胞前后，GSH水平分别为(10.3±1.6)nmol/mg蛋白和(4.6±2.1)nmol/mg蛋白，差异有统计学意义(P<0.01)，随药物浓度的增加，GSH水平进一步下降。抗氧化剂GSH逆转了Jaridonin诱导的EC–1细胞中H₂O₂水平的升高、DNA损伤和细胞凋亡。Jaridonin对人正常肝细胞L–02的生长情况无明显影响。

结论

Jaridonin通过消耗GSH的含量引起H₂O₂水平的升高而诱导DNA损伤，最终选择性诱导了食管癌细胞的凋亡。