【摘 要】
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根据猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）ORF7和猪圆环病毒2型（PCV2）ORF1的核苷酸序列设计特异性引物，经RT-PCR／PCR扩增，分别扩增出大小为308bp和417bp的部分基因片段。用T4连接酶将目的
【机 构】
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中国农业大学农业部预防兽医学重点开放实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（30371072）
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根据猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）ORF7和猪圆环病毒2型（PCV2）ORF1的核苷酸序列设计特异性引物，经RT-PCR／PCR扩增，分别扩增出大小为308bp和417bp的部分基因片段。用T4连接酶将目的片段与pGEM-Teasy载体系统莲接，并转化到大肠杆菌DH-5a株感受态细胞。提取的质粒经PCR、酶切和测序鉴定，证实为PRRSV和PCV2的阳性重组质粒。将重组标准质粒10倍系列稀释后作为模板，通过实时荧光定量PCR方法（Real-time PCR），建立了PRRSV、PCV2的标准曲线及其直
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