人Endostatin基因的克隆及其在Hela细胞中的表达

• 作 者: 陈明杰 扈廷茂 苏慧敏 刘明秋
• 机 构: 内蒙古大学生命科学学院
• 出 处: 内蒙古大学学报：自然科学版
• 发表日期: 2007年4期
• 关键词: ENDOSTATIN RT—PCR 脂质体转染 免疫细胞化学 HELA Endostatin RT-PCR transfection with lipo
• 基金项目: 内蒙古自然科学基金项目（重点：200607010502）

利用RT—PCR克隆人Endostatin基因，分别构建到双顺反子表达载体pIRES2-EGFP和融合表达载体pEGFP—C1中．两个重组表达载体利用脂质体介导转染真核细胞Hela，48h后可在荧光显微镜下观察到被转染细胞发出绿色荧光．传代10次后，绿色荧光仍持续表达，说明是稳定转染．以转染细胞的总DNA为模板PCR检测Endostatin基因已整合到细胞染色体上．利用兔抗人Endostatin抗体对已转染细胞进行免疫组化检测，显微镜下观察，转染的细胞显棕红色，表明Endostatin在转染细胞内稳定表达