间接免疫荧光法检测鼠疫杆菌F1抗体

来源 :中国预防医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ggyy2000_2000
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目的 构建鼠疫杆菌F1抗原结构基因Cafl的重组载体pCDNA3.1-hisB-Caf1,在NIH3T3细胞中稳定表达,并用表达F1抗原的细胞株作为诊断抗原,探讨间接免疫荧光法(IFA)检测鼠血清中鼠疫杆菌F1抗体的可行性.方法 将caf1基因克隆列质粒pCDNA3.1-hisB的多克隆位点上,构建重组载体pCDNA3.1-hisB-caf1,重组载体经脂质体转染至NIH3T3细胞中,G418筛选获得抗性细胞株,并以此细胞株为诊断抗原,IFA检测鼠血清中的F1抗体.结果 经IFA证实,pCDNA3.1-hisB-caf1能在NIH3T3细胞中稳定表达,并能与1例经ELISA检测为F1抗体阳性的鼠血清发生特异性反应.结论 NIH3T3细胞稳定表达的F1抗原可作为IFA中的侯选抗原,检测鼠血清中的F1抗体.
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