论文部分内容阅读
目的 探讨人骨髓来源MSCs的分离、培养和生物学特性,为骨组织工程提供种子细胞.方法从捐赠者髂骨穿刺收取骨髓细胞,采用密度梯度离心和贴壁培养法进行培养和纯化BMSCs,取生长良好的P3或P4代BMSCs进行检测:①MTT法测定细胞增殖和生长曲线分析;②流式细胞仪检测BMSCs细胞表面抗原标记和细胞增殖周期;③免疫荧光分析细胞骨架;④细胞染色体核型分析;⑤成骨细胞诱导分化及检测.结果①利用密度梯度离心和贴壁筛选的方法分离人BMSCs,经传代后细胞形态呈梭形,均匀一致.②MTT法测定细胞增殖和生长曲线分析结果显示BMSCs在传代后经历潜伏期、对数生长期和平台期.③流式细胞仪检测显示所获得的BMSCs表面抗原标记高度一致.④BMSCs细胞周期检测结果为G0+G1期913%、G2期4.1%和S期4.6%.⑤微管微丝免疫荧光染色结果显示,培养的BMSCs具有良好的细胞骨架系统.⑥第7代的BMSCs染色体检测结果显示,被测标本有正常染色体数目(2n=46,XY),且未见染色体异常.⑦成骨诱导后,Vonkossa和茜素红染色均呈阳性.结论 从人骨髓中能分离出高度一致的BMSCs,这些细胞具有正常细胞骨架结构以及正常的人类染色体数目和形态,具有向成骨细胞分化能力,可作为骨组织工程的种子细胞。