腺病毒介导hTGF-β1基因体内转染兔椎间盘髓核细胞的表达

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目的观察以腺病毒为载体的外源性治疗基因Ad/CMV-hTGF-β1转染兔椎间盘髓核细胞后的表达.方法采用本实验室构建的腺病毒载体基因Ad/CMV-hTGF-β1 20μl(6×106 pfu)注射于纯种成年新西兰大白兔腰椎间盘髓核内;手术后不同时间分别取出椎间盘,用免疫组织化学方法对椎间盘髓核细胞进行基因表达产物测定;用VIDAS图像分析系统进行半定量观察.结果免疫组织化学染色显示注射Ad/CMV-hTGF-β1椎间盘,4 d组可见髓核细胞内呈现阳性染色颗粒;1周组即显示强阳性染色,阳性表达持续至12周组.实验对照组及自身椎间盘对照组呈阴性或弱阳性反应.结论椎间盘髓核作为靶细胞能够被外源性基因转染;腺病毒载体基因Ad/CMV-hTGF-β1转染兔椎间盘髓核细胞后能在相当长时间内表达TGF-β1蛋白.
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