猪脑突触体质膜（Ca^2＋—Mg^2＋）—ATPase的分离纯化与性质

• 作 者: 范晓轩 张旭家
• 机 构: 中国科学院生物物理研究所,中国科学院生物物理研究所
• 出 处: 生物化学与生物物理进展
• 发表日期: 2001年1期
• 关键词: 质膜Ca^2+-ATPase 纯化 钙调蛋白亲和层析 性质 plasma membrane Ca2+-ATPase purification calmoduli
• 基金项目: 中国科学院资助项目，国家自然科学基金

以猪脑为材料，经匀浆、差速离心、蔗糖密度梯度离心分离突触体.低渗破膜得到突触体膜.Triton X100增溶后，经钙调蛋白亲和层析可得去脂的质膜Ca2+-ATPase.用大体积亲和柱和大体积低Ca2+淋洗液淋洗，可得产率、纯度和活性均较高的质膜Ca2+-ATPase.与大豆磷脂保温后，去脂的Ca2+-ATPase的水解活力可恢复达3.32 μmol/(mg·min).SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳银染显示单一蛋白质带，分子质量约为140 ku，纯度在90％以上.不同Ca2+浓度明显影响酶的活力.