【摘 要】
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目的 探讨轴索型腓骨肌萎缩症2L(axonal Charcot-Marie-Tooth disease type 2L,CMT2L)K141N突变的热休克蛋白B8(heat shock protein B8,HSPB8)对细胞相对活力的影响.方法 应
【机 构】
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河南省人民医院神经内科,中南大学湘雅医院神经内科,中南大学湘雅医院中国医学遗传学国家重点实验室
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目的 探讨轴索型腓骨肌萎缩症2L(axonal Charcot-Marie-Tooth disease type 2L,CMT2L)K141N突变的热休克蛋白B8(heat shock protein B8,HSPB8)对细胞相对活力的影响.方法 应用脂质体转染技术,将野生型HSPB8(wt HSPB8)和K141N突变型HSPB8( K141N HSPB8)分别转染SHSY-5Y细胞,使其过量表达上述蛋白,以表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)为阴性对照,转染24 h后用44℃致死性热休克处理40 min,用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测SHSY-5Y细胞的相对活力.结果 未处理组pEGFP-wt HSPB8与pEGFP-K141N HSPB8组间吸光度值比较P＞0.05,而热休克处理组pEGFP-wt HSPB8与pEGFP-K141N HSPB8组间吸光度值比较P＜0.05,表明热休克处理后各组细胞相对活力差异有统计学意义,热休克处理后过表达wt HSPB8的SHSY-5Y细胞活力最高,过表达K141N HSPB8的细胞次之,过表达GFP空载体的细胞活力最低.结论 证实了HSPB8在细胞受到致死性热休克刺激时对于保护细胞活力方面起着重要作用,K141N突变型HSPB8对细胞相对活力的保护作用较野生型HSPB8减弱.
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