【摘 要】
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目的 探讨白芍总苷（total glucosides of paeony TGP）对类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞（FLS）增殖、凋亡和炎性因子的影响及分子机制。方法 分离培养FLS,实验分为对照（NC）组（不作任何处理）、不同浓度白芍总苷组(0.5、1.0、1.5 mg·mL-1白芍总苷)、miR-NC组（转染miR-34a模拟物对照）、miR-34a组（转染miR-34a模拟物）、anti-m
【基金项目】
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国家中医临床研究基地科研专项（2019JDZX045）；
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目的 探讨白芍总苷（total glucosides of paeony TGP）对类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞（FLS）增殖、凋亡和炎性因子的影响及分子机制。方法 分离培养FLS,实验分为对照（NC）组（不作任何处理）、不同浓度白芍总苷组(0.5、1.0、1.5 mg·mL-1白芍总苷)、miR-NC组（转染miR-34a模拟物对照）、miR-34a组（转染miR-34a模拟物）、anti-miR-NC组（转染miR-34a抑制剂对照）、anti-miR-34a组（转染miR-34a抑制剂）、白芍总苷+anti-miR-NC组(1.5 mg·mL-1白芍总苷+转染miR-34a抑制剂对照)、白芍总苷+anti-miR-34a组(1.5 mg·mL-1白芍总苷+转染miR-34a抑制剂)。细胞计数试剂盒8（CCK-8）检测细胞增殖活力；流式细胞术检测细胞凋亡；蛋白质印迹（Western blot）法检测细胞增殖核抗原Ki67（Ki67）、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Cleaved caspase-3）、磷酸化p65（p-p65）、磷酸化核因子κB抑制蛋白α（p-IкBα）蛋白表达；酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒检测白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平；实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测miR-34a表达水平。结果 与对照组相比，不同浓度白芍总苷组Ki67表达水平降低，Cleaved-caspase-3表达水平升高，细胞活力降低，细胞凋亡率升高（P＜0.05）;白芍总苷组IL-6、TNF-α含量显著降低，miR-34a表达水平显著升高，p-p65、p-IкBα蛋白表达水平降低（P＜0.05）。过表达miR-34a抑制FLS增殖和炎性因子释放，诱导细胞凋亡；而抑制miR-34a表达作用相反。且抑制miR-34a表达逆转了白芍总苷对FLS细胞增殖、凋亡、炎症因子释放及核因子-κB（NF-κB）信号通路的影响。结论 白芍总苷可能通过上调miR-34a表达抑制NF-κB信号通路抑制类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞增殖和炎性因子释放，并诱导细胞凋亡。
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