【摘 要】
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目的:探讨建立荧光定量PCR法直接检测临床标本的肺炎链球菌并对其进行血清学分型的可行性.方法:针对肺炎链球菌种属特异性基因lytA及该菌常见的21种血清型设计荧光探针及引物
【机 构】
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广西柳州市妇幼保健院重症医学科 广西 柳州 545001;广西柳州市妇幼保健院检验科 广西 柳州 545001;广西柳州市妇幼保健院儿科 广西 柳州 545001;广西柳州市妇幼保健院输血科 广西 柳
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目的:探讨建立荧光定量PCR法直接检测临床标本的肺炎链球菌并对其进行血清学分型的可行性.方法:针对肺炎链球菌种属特异性基因lytA及该菌常见的21种血清型设计荧光探针及引物,构建Taqman荧光定量PCR法.使用荚膜肿胀试验作为金标准检测PCR方法的灵敏度及特异度,选择1209份临床样本同时做培养及PCR方法,比较两种方法的肺炎链球菌检出率及血清分型情况.结果:构建Taqman荧光定量PCR法灵敏度及特异度分别为94.2％及70％.Taqman荧光探针PCR法鉴定的主要血清型别为19F(43.7％)、6A/B (17.2％)、23F (13.8％)、19A(6.8％),未能分型的肺炎链球菌为17.2％.荚膜肿胀试验鉴定的主要血清型别为19F(39.1％)、6A/B(17.2％)、23F(9.2％)、19A(5.7％),未能分型的肺炎链球菌为28.7％.1209份临床样本仅培养出16份肺炎链球菌,Taqman荧光定量PCR法检出44例肺炎链球菌,其对临床样本肺炎链球菌阳性检出率更高,其差异有显著统计学意义(x-2=13.39,P＜0.001).结论:Taqman荧光探针PCR法灵敏度高、特异度好,能直接对临床样本进行血清学分型,可大幅度缩短肺炎链球菌检测的报告时间.
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