EB病毒BARF1基因真核表达载体的构建

• 作 者: 刘智群 王梅梅 侯灵彤 张放 熊亚南 刘敏 李淑英
• 机 构: 河北联合大学冀唐学院,河北联合大学基础医学院,河北联合大学附属医院,唐山市中医院
• 出 处: 河北联合大学学报：医学版
• 发表日期: 2012年1期
• 关键词: EB病毒 BARF1基因 真核表达载体 BARF1. Prokaryotic vector. Recombinant
• 基金项目: 河北省科技厅课题（编号：Z2008316）.

①目的构建携带EB病毒（Epstein—Barr virus，EBV）编码BARF1基因的真核表达载体。②方法根据GenBan提供的BARF1基因的cDNA序列，设计特异性引物，并在雨端添加酶切位点；常规培养B95—8细胞，提取细胞RNA，通过RT-PCR扩增BARFi基因，将其克隆到pUM—T载体，转化E．eoli DH5α，经氨苄青霉素抗性筛选阳性克隆，提取质粒并用EcoRI和XbaI双酶切与测序鉴定，证实BARF1基因已克隆到pUM—T载体。凝胶回收双酶切产物BARF1片段，再将其连接到真核表达载体