猪传染性胃肠炎病毒四川株的分离鉴定与一步生长曲线的测定

• 作 者: 代洪波 陈蕾 朱玲 周远成 郭万柱 徐志文
• 机 构: 四川农业大学动物生物技术中心; 动物疫病与人类健康四川省重点实验室
• 出 处: 中国兽医科学
• 发表日期: 2012年12期
• 关键词: 猪传染性胃肠炎病毒 分离鉴定 荧光定量PCR 一步生长曲线
• 基金项目: 四川省科技支撑计划项目(2011FZ0065);四川省科技支撑计划项目——生猪现代产业链关键技术研究集成与产业化示范(2012NZ0001)

为研究猪传染性胃肠炎病毒的生长规律,利用PK-15细胞从四川仔猪腹泻样品中分离得到1株病毒,经PCR检测、病毒理化试验与微量中和试验证实,该分离株为猪传染性胃肠炎病毒(TGEV),被命名为SC-T。以SC-T分离株感染PK-15细胞,感染后不同时间分别收集感染细胞与上清,利用TGEV荧光定量检测方法对不同样品中病毒RNA进行定量分析,绘制TGEV一步生长曲线。结果显示,感染后第2～8小时,细胞内病毒RNA含量迅速增长,第8～32小时细胞内病毒RNA含量变化不大,维持在较高水平。细胞外病毒RNA含量呈"S型"曲线增长,感染后第0～6小时为潜伏期,病毒RNA含量维持在较低水平;第6～28小时为突破期,病毒RNA含量呈对数增长;感染后第28～32小时增长速度减缓,维持在较高水平,逐步进入稳定期。结果表明,TGEV感染PK-15细胞,病毒在细胞内增殖到一定数量以后,便逐步向胞外释出。