论文部分内容阅读
摘要：利用SDS-PAGE的方法分析了我国北方麦区近年来育成的194份小麦品种（品系）高分子量谷蛋白亚基的组成。结果表明，供试材料高分子量谷蛋白亚基变异较为丰富，共检测出15种亚基类型，30种亚基组合。各位点出现频率最高的亚基为Glu-A1位点的1亚基（61.86%），Glu-B1位点的7 9亚基（46.39%），Glu-D1位点的2 12亚基（57.22%）。出现频次最高的亚基组合为（Null、7 9、2 12）（17.01%）。亚基组合数以及各优质亚基出现的频率地区之间的变化均不同，其中河北地区出现的亚基组合类型数最多（20种）。Glu-A1位点上，只有河北的品种出现了优质亚基2*，亚基1出现频率最高的为河南品种（70.83%）；Glu-B1位点上，河北和河南品种出现频率最高的亚基均为7 9，而山东品种出现频率最高的亚基为7 8；Glu-D1位点上，优质亚基5 10在山东地区出现的频率最高。近年来，1亚基、7 9亚基和5 10亚基所占的比例明显升高，表明国外种质资源的利用频率在增加，各育种单位更加注重优质育种。
关键词：小麦；高分子量谷蛋白亚基；分布；组成
中图分类号： S512.101文献标志码： A文章编号：1002-1302（2015）11-0112-04
收稿日期：2014-11-04
基金项目：河北省现代农业产业技术体系（编号：1004002）。
作者简介：李晓云（1989—），女，河北石家庄人，硕士研究生，主要从事小麦遗传资源研究与利用。E-mail：yun890324@163.com。
通信作者：杨学举，博士，教授，博士生导师，主要从事小麦遗传育种和种质资源研究。E-mail：shmyxj@hebau.edu.cn。高分子量谷蛋白亚基（high molecular weight glutenin subunit，HMW-GS）与小麦加工品质密切相关。小麦HMW-GS的合成受第一同源群染色体1A、1B和1D长臂上的基因控制，分别称作Glu-A1、Glu-B1和Glu-D1，这3个基因位点存在着广泛的变异形式，不同的等位基因变异以及不同的亚基组合类型对小麦加工品质的影响差异较大[1]。研究表明，Glu-A1编码的1、2*亚基，Glu-B1编码的7 8、17 18、13 16亚基及Glu-D1编码的5 10亚基对烘烤品质效应的贡献较大[2-5]。14 15是我国小麦品种特有的亚基，刘艳华等研究发现，14 15亚基对小麦的加工品质有很大的贡献，甚至好于7 8亚基[6]。控制HMW-GS的位点间存在互作效应，优质亚基组合比单个优质亚基位点在育种中更具有指导意义[7]。Cornish等和刘丽等的研究都表明，具有亚基组合（2*、7 8、5 10）的小麦品种有较好的面包烘烤品质[8-9]，而具有亚基组合（Null、7 9、2 12）的品种的面包烘烤品质较差[8]。此外，范玉顶等研究发现，具有亚基组合类型（1、7 8、2 12）和（Null、7 8、2 12）的小麦品种适于制作馒头[10]。赵京岚等认为（1、14 15、2 12）是适于制作面条的亚基组合类型[11]。因此，利用和创造优质亚基组合，是小麦品质育种的重要研究内容[12-14]。
本研究拟利用SDS-PAGE的方法对我国北方麦区近年来育成的194份小麦品种（品系）的HMW-GS的组成进行分析，以期了解近年来我国北方小麦主产区品种（品系）高分子量谷蛋白亚基的分布状况，发掘具有优质亚基组合的种质类型，为小麦品质改良和育种提供优质的种质资源。
1材料与方法
1.1材料
供试材料共194份，由河北省作物种质资源实验室提供。供试材料包括河北品种98份、河南品种48份、山东品种48份。
1.2方法
HMW-GS电泳参考张玲丽等的方法[15]，略有改动，即SDS-PAGE分离胶的浓度调整为8%。HMW-GS的命名根据Payne等的方法[16]进行。HMW-GS组成分析以中国春（Null、7 8、2 12）为对照。
2结果与分析
2.1供试材料HMW-GS的组成和频率
SDS-PAGE部分电泳图谱见图1，HMW-GS在不同位点上的变异类型及其频率见表1。供试材料中共检测出15种亚基类型，其中Glu-A1位点有3种亚基：Null、1和2*，1亚基出现的频率最高，为61.86%，2*的出现的频率为103%，1和2*亚基与较好的面包烘烤品质相关；Glu-B1位点具有8种亚基：7 9、7 8、6 8、17 18、14 15、13 19、13 16和20，其中7 9亚基出现的频率最高，为46.39%，其次为7 8亚基和14 15亚基，出现的频率分别为28.87%和14.95%；Glu-D1位点有4种亚基：2 10、2 12、4 12和5 10，其中2 12亚基出现的频率最高，为57.22%，优质亚基5 10出现的频率为32.47%。
2.2供试材料HMW-GS的组合形式和频率
由表2可知，194份供试材料共形成30种亚基组合，亚基组合类型较为分散多样。其中以亚基组合（Null、7 9、2 12）最多，占供试材料的17.01%，具有该亚基组合的小麦品种品质较差（筋力较弱），其次为（1、7 9、2 12），出现的频率为12.89%。适于制作馒头的优质亚基组合（1、7 8、2 12）和（Null、7 8、2 12）[10]出现的频率分别为10.82%和4.12%，适于制作面条的优质亚基组合（1、14 15、2 12）[11]出现的频率为8.76%，适于制作面包的优质亚基组合（1、7 8、5 10）、（1、14 15、5 10）、（1、13 16、5 10）以及（1、17 18、5 10），出现的频率分别为5.15%、1.03%、0.52%和3.61%，供试材料中适合制作面条、馒头和面包的优质亚基组合合计占供试材料的34.01%，由此可见，供试材 HMW-GS 组合虽然较为丰富，但优质亚基组合较少，品质较差。 2.3供试材料HMW-GS地区之间的分布特点
以小麦品种所在省份为组，分析了河北（98份）、河南（48份）和山东（48份）品种的HMW-GS分布情况（表3、表4）。各地区品种的亚基组合类型数不同，优质亚基出现的频率也不相同。
由表3可知，Glu-A1位点上，只有河北地区出现了优质亚基2*。亚基1在河南地区出现的频率最高，为71.43%，其次是河北和山东，出现的频率分别为59.18%和58.33%。Glu-B1 位点上，河北和河南地区出现频率最高的亚基均为 7 9，其出现的频率分别为54.08%和58.33%，而山东地区出现频率最高的亚基为7 8，频率为45.83%。Glu-D1位点上，优质亚基5 10在山东地区出现的频率最高，为4375%，其次为河南和河北，其出现的频率分别为37.50%和26.53%。
3讨论
3.1HMW-GS在不同年代的分布特点
HMW-GS被认为是麦谷蛋白的关键组分，HMW-GS的组成分析对麦谷蛋白的遗传研究和小麦品质改良有重要意义。毛沛在1992年对2 292份中国育成材料的HMW-GS的组成进行了分析，发现1A位点出现频率最高的亚基为Null（57.4%），其次为亚基1（27.6%），1B位点上出现频率最高的亚基为7 8（42.0%），其次为亚基7 9（41.9%），1D位点上中国育成材料优质亚基5 10的出现频率为15.7%[17]。
关正君在2003年对227份国内小麦骨干种质材料的HMW-GS进行了分析，研究发现1A位点上Null亚基出现的频率最高（63.44%），其次为亚基1（27.75%），1B位点上出现频率最高的亚基为7 9（41.85%），其次为亚基7 8（34.36%），1D位点上优质亚基5 10出现的频率为8.37%[18]。张丽琴等在2012年对黄淮麦区小麦新品种（系）高分子量谷蛋白亚基的组成进行了分析，发现1A位点上出现频率最高的亚基为1（61.17%），其次为亚基Null（39.39%），1B位点上出现频率最高的亚基为7 9（62.11%），其次为亚基7 8（21.59%），1D位点上优质亚基5 10出现的频率为40.97%[19]。本研究共分析了194份小麦品种（品系）的高分子量谷蛋白亚基的组成，结果发现1A位点上出现率最高的亚基为1（61.86%），其次为亚基Null（31.77），1B位点上出现频率最高的亚基为7 9（46.39%），其次为亚基7 8（28.87%），1D位点上优质亚基5 10出现的频率为32.47%。
研究发现，Glu-A1位点上亚基Null对品质的效应最小，低于亚基1，而Glu-D1位点上，研究者几乎公认5 10亚基优于该位点其他所有的变异形式。由以上分析可知，通过近20年的改良，Glu-A1位点上的亚基1以及Glu-D1位点上亚基5 10出现的频率有了很大的提高，亚基频率的提高可能是引进新的、尤其国外的小麦种质的结果，说明近年来我国小麦品质改良工作取得了较显著的成果。Glu-1B位点上7 9亚基对品质的贡献低于7 8亚基，但其比例却呈上升趋势，这可能是因为含有7 9亚基的品种（品系）与产量性状的相关性较好，董中东等认为含有7 9亚基的品种（品系）的播期范围较宽，适应性强[20]。随着育种工作者加强了对小麦品质育种的重视，含有1和5 10等优质亚基品种（品系）的比率得到大幅度提高，但在利用HMW-GS进行小麦品质改良时还存在一个较大的问题，即各位点优质亚基的引入不平衡，目前优质亚基的引入主要体现在Glu-A1位点的1亚基上，Glu-A1位点的2*亚基以及Glu-B1位点和Glu-D1 位点上各优质亚基的比率较低。利用HMW-GS进行品质育种时，实现1A、1B和1D 3个位点优质亚基的同时聚合，比引入单个亚基效果更明显，因为研究表明品质较好的小麦品种含的优质亚基的数量较多[21]。
3.2不同地区小麦品种高分子量谷蛋白亚基组成分析
由研究结果可知，3个省份的亚基组合类型数不同，各优质亚基出现的频率也不相同。3个地区Glu-A1位点1亚基出现的频率均较高，但2*亚基出现的频率较低，仅在河北地区出现；Glu-B1位点上亚基的变异类型较为丰富，山东地区优质亚基出现的频率高于河北和河南地区；Glu-D1位点上与较好的面包烘烤品质相关的5 10亚基出现的频率较低，最高的山东地区也仅为39.58%。从亚基组合类型的分布情况来看3个地区在优质亚基组成方面各具特色，统计不同育种单位所育品种（系），发现有些育种单位所育品（种）系的HMW-GS的组成相似度较高，因此在搜集小麦种质资源时，各育种单位间应当相互引进与交换，在保持自己优势的同时来弥补不足。
参考文献：
[1]李硕碧，高翔，单明珠，等. 小麦高分子量谷蛋白亚基与加工品质[M]. 北京：中国农业出版社，2001：22-32.
[2]马传喜，吴兆苏. 小麦胚乳蛋白质组分及高分子量麦谷蛋白亚基与烘烤品质的关系[J]. 作物学报，1993，19（6）：562-566.
[3]Payne P I，Nightingale M A，Krattiger A F，et al. The relationship between HMW glutenin subunit composition and the bread-making quality of British-grown wheat varieties[J]. Journal of the Science of Food and Agriculture，1987，40：51-65
[4]程国旺，徐风，马传喜，等. 小麦高分子量麦谷蛋白亚基组成与面包烘烤品质关系的研究[J]. 安徽农业大学学报，2002，29（4）：369-372. [5]Grama A，Wright D S，Cressey P J，et al. Hexaploid wild emmer whear derivatives grown under New Zealand conditions.1. Relationship between protein-composition and quality parameters[J]. New Zealand Journal of Agricultural Research，1987，30（1）：35-43.
[6]刘艳华，王洪刚，刘树兵，等. 小麦高分子量谷蛋白亚基14 15、7 8、1与部分品质性状关系的研究[J]. 华北农学报，2003，18（3）：4-7.
[7]刘丽，周阳，何中虎，等. Glu-1和Glu-3等位变异对小麦加工品质的影响[J]. 作物学报，2004，30（10）：959-968.
[8]Cornish G B，Bueeidge P M，Palmer G A. Mapping the origins of some HMW
关键词：小麦；高分子量谷蛋白亚基；分布；组成
中图分类号： S512.101文献标志码： A文章编号：1002-1302（2015）11-0112-04
收稿日期：2014-11-04
基金项目：河北省现代农业产业技术体系（编号：1004002）。
作者简介：李晓云（1989—），女，河北石家庄人，硕士研究生，主要从事小麦遗传资源研究与利用。E-mail：yun890324@163.com。
通信作者：杨学举，博士，教授，博士生导师，主要从事小麦遗传育种和种质资源研究。E-mail：shmyxj@hebau.edu.cn。高分子量谷蛋白亚基（high molecular weight glutenin subunit，HMW-GS）与小麦加工品质密切相关。小麦HMW-GS的合成受第一同源群染色体1A、1B和1D长臂上的基因控制，分别称作Glu-A1、Glu-B1和Glu-D1，这3个基因位点存在着广泛的变异形式，不同的等位基因变异以及不同的亚基组合类型对小麦加工品质的影响差异较大[1]。研究表明，Glu-A1编码的1、2*亚基，Glu-B1编码的7 8、17 18、13 16亚基及Glu-D1编码的5 10亚基对烘烤品质效应的贡献较大[2-5]。14 15是我国小麦品种特有的亚基，刘艳华等研究发现，14 15亚基对小麦的加工品质有很大的贡献，甚至好于7 8亚基[6]。控制HMW-GS的位点间存在互作效应，优质亚基组合比单个优质亚基位点在育种中更具有指导意义[7]。Cornish等和刘丽等的研究都表明，具有亚基组合（2*、7 8、5 10）的小麦品种有较好的面包烘烤品质[8-9]，而具有亚基组合（Null、7 9、2 12）的品种的面包烘烤品质较差[8]。此外，范玉顶等研究发现，具有亚基组合类型（1、7 8、2 12）和（Null、7 8、2 12）的小麦品种适于制作馒头[10]。赵京岚等认为（1、14 15、2 12）是适于制作面条的亚基组合类型[11]。因此，利用和创造优质亚基组合，是小麦品质育种的重要研究内容[12-14]。
本研究拟利用SDS-PAGE的方法对我国北方麦区近年来育成的194份小麦品种（品系）的HMW-GS的组成进行分析，以期了解近年来我国北方小麦主产区品种（品系）高分子量谷蛋白亚基的分布状况，发掘具有优质亚基组合的种质类型，为小麦品质改良和育种提供优质的种质资源。
1材料与方法
1.1材料
供试材料共194份，由河北省作物种质资源实验室提供。供试材料包括河北品种98份、河南品种48份、山东品种48份。
1.2方法
HMW-GS电泳参考张玲丽等的方法[15]，略有改动，即SDS-PAGE分离胶的浓度调整为8%。HMW-GS的命名根据Payne等的方法[16]进行。HMW-GS组成分析以中国春（Null、7 8、2 12）为对照。
2结果与分析
2.1供试材料HMW-GS的组成和频率
SDS-PAGE部分电泳图谱见图1，HMW-GS在不同位点上的变异类型及其频率见表1。供试材料中共检测出15种亚基类型，其中Glu-A1位点有3种亚基：Null、1和2*，1亚基出现的频率最高，为61.86%，2*的出现的频率为103%，1和2*亚基与较好的面包烘烤品质相关；Glu-B1位点具有8种亚基：7 9、7 8、6 8、17 18、14 15、13 19、13 16和20，其中7 9亚基出现的频率最高，为46.39%，其次为7 8亚基和14 15亚基，出现的频率分别为28.87%和14.95%；Glu-D1位点有4种亚基：2 10、2 12、4 12和5 10，其中2 12亚基出现的频率最高，为57.22%，优质亚基5 10出现的频率为32.47%。
2.2供试材料HMW-GS的组合形式和频率
由表2可知，194份供试材料共形成30种亚基组合，亚基组合类型较为分散多样。其中以亚基组合（Null、7 9、2 12）最多，占供试材料的17.01%，具有该亚基组合的小麦品种品质较差（筋力较弱），其次为（1、7 9、2 12），出现的频率为12.89%。适于制作馒头的优质亚基组合（1、7 8、2 12）和（Null、7 8、2 12）[10]出现的频率分别为10.82%和4.12%，适于制作面条的优质亚基组合（1、14 15、2 12）[11]出现的频率为8.76%，适于制作面包的优质亚基组合（1、7 8、5 10）、（1、14 15、5 10）、（1、13 16、5 10）以及（1、17 18、5 10），出现的频率分别为5.15%、1.03%、0.52%和3.61%，供试材料中适合制作面条、馒头和面包的优质亚基组合合计占供试材料的34.01%，由此可见，供试材 HMW-GS 组合虽然较为丰富，但优质亚基组合较少，品质较差。 2.3供试材料HMW-GS地区之间的分布特点
以小麦品种所在省份为组，分析了河北（98份）、河南（48份）和山东（48份）品种的HMW-GS分布情况（表3、表4）。各地区品种的亚基组合类型数不同，优质亚基出现的频率也不相同。
由表3可知，Glu-A1位点上，只有河北地区出现了优质亚基2*。亚基1在河南地区出现的频率最高，为71.43%，其次是河北和山东，出现的频率分别为59.18%和58.33%。Glu-B1 位点上，河北和河南地区出现频率最高的亚基均为 7 9，其出现的频率分别为54.08%和58.33%，而山东地区出现频率最高的亚基为7 8，频率为45.83%。Glu-D1位点上，优质亚基5 10在山东地区出现的频率最高，为4375%，其次为河南和河北，其出现的频率分别为37.50%和26.53%。
3讨论
3.1HMW-GS在不同年代的分布特点
HMW-GS被认为是麦谷蛋白的关键组分，HMW-GS的组成分析对麦谷蛋白的遗传研究和小麦品质改良有重要意义。毛沛在1992年对2 292份中国育成材料的HMW-GS的组成进行了分析，发现1A位点出现频率最高的亚基为Null（57.4%），其次为亚基1（27.6%），1B位点上出现频率最高的亚基为7 8（42.0%），其次为亚基7 9（41.9%），1D位点上中国育成材料优质亚基5 10的出现频率为15.7%[17]。
关正君在2003年对227份国内小麦骨干种质材料的HMW-GS进行了分析，研究发现1A位点上Null亚基出现的频率最高（63.44%），其次为亚基1（27.75%），1B位点上出现频率最高的亚基为7 9（41.85%），其次为亚基7 8（34.36%），1D位点上优质亚基5 10出现的频率为8.37%[18]。张丽琴等在2012年对黄淮麦区小麦新品种（系）高分子量谷蛋白亚基的组成进行了分析，发现1A位点上出现频率最高的亚基为1（61.17%），其次为亚基Null（39.39%），1B位点上出现频率最高的亚基为7 9（62.11%），其次为亚基7 8（21.59%），1D位点上优质亚基5 10出现的频率为40.97%[19]。本研究共分析了194份小麦品种（品系）的高分子量谷蛋白亚基的组成，结果发现1A位点上出现率最高的亚基为1（61.86%），其次为亚基Null（31.77），1B位点上出现频率最高的亚基为7 9（46.39%），其次为亚基7 8（28.87%），1D位点上优质亚基5 10出现的频率为32.47%。
研究发现，Glu-A1位点上亚基Null对品质的效应最小，低于亚基1，而Glu-D1位点上，研究者几乎公认5 10亚基优于该位点其他所有的变异形式。由以上分析可知，通过近20年的改良，Glu-A1位点上的亚基1以及Glu-D1位点上亚基5 10出现的频率有了很大的提高，亚基频率的提高可能是引进新的、尤其国外的小麦种质的结果，说明近年来我国小麦品质改良工作取得了较显著的成果。Glu-1B位点上7 9亚基对品质的贡献低于7 8亚基，但其比例却呈上升趋势，这可能是因为含有7 9亚基的品种（品系）与产量性状的相关性较好，董中东等认为含有7 9亚基的品种（品系）的播期范围较宽，适应性强[20]。随着育种工作者加强了对小麦品质育种的重视，含有1和5 10等优质亚基品种（品系）的比率得到大幅度提高，但在利用HMW-GS进行小麦品质改良时还存在一个较大的问题，即各位点优质亚基的引入不平衡，目前优质亚基的引入主要体现在Glu-A1位点的1亚基上，Glu-A1位点的2*亚基以及Glu-B1位点和Glu-D1 位点上各优质亚基的比率较低。利用HMW-GS进行品质育种时，实现1A、1B和1D 3个位点优质亚基的同时聚合，比引入单个亚基效果更明显，因为研究表明品质较好的小麦品种含的优质亚基的数量较多[21]。
3.2不同地区小麦品种高分子量谷蛋白亚基组成分析
由研究结果可知，3个省份的亚基组合类型数不同，各优质亚基出现的频率也不相同。3个地区Glu-A1位点1亚基出现的频率均较高，但2*亚基出现的频率较低，仅在河北地区出现；Glu-B1位点上亚基的变异类型较为丰富，山东地区优质亚基出现的频率高于河北和河南地区；Glu-D1位点上与较好的面包烘烤品质相关的5 10亚基出现的频率较低，最高的山东地区也仅为39.58%。从亚基组合类型的分布情况来看3个地区在优质亚基组成方面各具特色，统计不同育种单位所育品种（系），发现有些育种单位所育品（种）系的HMW-GS的组成相似度较高，因此在搜集小麦种质资源时，各育种单位间应当相互引进与交换，在保持自己优势的同时来弥补不足。
参考文献：
[1]李硕碧，高翔，单明珠，等. 小麦高分子量谷蛋白亚基与加工品质[M]. 北京：中国农业出版社，2001：22-32.
[2]马传喜，吴兆苏. 小麦胚乳蛋白质组分及高分子量麦谷蛋白亚基与烘烤品质的关系[J]. 作物学报，1993，19（6）：562-566.
[3]Payne P I，Nightingale M A，Krattiger A F，et al. The relationship between HMW glutenin subunit composition and the bread-making quality of British-grown wheat varieties[J]. Journal of the Science of Food and Agriculture，1987，40：51-65
[4]程国旺，徐风，马传喜，等. 小麦高分子量麦谷蛋白亚基组成与面包烘烤品质关系的研究[J]. 安徽农业大学学报，2002，29（4）：369-372. [5]Grama A，Wright D S，Cressey P J，et al. Hexaploid wild emmer whear derivatives grown under New Zealand conditions.1. Relationship between protein-composition and quality parameters[J]. New Zealand Journal of Agricultural Research，1987，30（1）：35-43.
[6]刘艳华，王洪刚，刘树兵，等. 小麦高分子量谷蛋白亚基14 15、7 8、1与部分品质性状关系的研究[J]. 华北农学报，2003，18（3）：4-7.
[7]刘丽，周阳，何中虎，等. Glu-1和Glu-3等位变异对小麦加工品质的影响[J]. 作物学报，2004，30（10）：959-968.
[8]Cornish G B，Bueeidge P M，Palmer G A. Mapping the origins of some HMW