【摘 要】
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目的:探讨丹参多酚酸盐联合尿路上皮癌相关基因1(UCA1)对帕金森综合征发生、发展的影响.方法:用2.5 mmol·L-1的1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP+)处理SK-N-SH构建帕金森细胞模型
【机 构】
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黄冈市中心医院神经内科 湖北黄冈 438000
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目的:探讨丹参多酚酸盐联合尿路上皮癌相关基因1(UCA1)对帕金森综合征发生、发展的影响.方法:用2.5 mmol·L-1的1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP+)处理SK-N-SH构建帕金森细胞模型,记为MPP+组,正常培养的细胞作为对照(con-trol)组;用浓度为100,200,400μg·ml-1的丹参多酚酸盐预处理SK-N-SH细胞再用2.5 mmol·L-1的MPP+处理,记为丹参多酚酸盐低、中、高浓度组.将pcDNA3.1、pcDNA3.1-UCA1转染至SK-N-SH细胞中再用2.5 mmol·L-1的MPP+处理,记为UCA1阴性对照组织、UCA1过表达组;将si-NC、si-UCA1转染至SK-N-SH细胞中用400μg·ml-1的丹参多酚酸盐和2.5 mmol·L-1的MPP+处理,记为UCA1抑制表达阴性对照组、UCA1抑制表达组.蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(P21)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)蛋白表达;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测UCA1表达水平.结果:MPP+处理SK-N-SH细胞中P21、caspase-3表达水平显著升高,细胞存活率显著降低,细胞凋亡率显著升高(P<0.05).不同浓度丹参多酚酸盐处理以及过表达UCA1的SK-N-SH细胞中P21、caspase-3表达水平显著降低,细胞存活率显著升高,细胞凋亡率显著降低(P<0.05).抑制UCA1表达逆转了丹参多酚酸盐对帕金森细胞的存活率、凋亡的影响.结论:丹参多酚酸盐联合UCA1可促进细胞存活,抑制MPP+诱导的SK-N-SH细胞凋亡.
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