【摘 要】
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为了建立一种高通量快速筛选重组葡萄糖氧化酶(GOD)毕赤酵母高产菌株的方法,转god基因毕赤酵母重组子在MM平板上培养,经甲醇诱导培养2天后在平板上覆盖显色液,室温显色30min,测
【基金项目】
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中央级公益性科研院所基本科研业务费“通过蛋白分子改良技术改善微生物酶的应用性质”(2010-08)
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为了建立一种高通量快速筛选重组葡萄糖氧化酶(GOD)毕赤酵母高产菌株的方法,转god基因毕赤酵母重组子在MM平板上培养,经甲醇诱导培养2天后在平板上覆盖显色液,室温显色30min,测定棕色圈直径并计算面积,然后评估棕色圈面积与GOD活力的相关性。室温显色30min后,当样品的GOD活力大于0.0005U时,平板上可观察到明显的棕色圈;经过与传统液体培养筛选方法的比较验证,该平板筛选方法灵敏度高,稳定性和重复性好,筛选结果与传统方法一致;并且当毕赤酵母重组子表达的GOD活力介于0~0.1U/mL的范围内时,
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