Hsv—tk、重组人TNF—α融合基因表达载体的构建及瞬时表达

• 作 者: 成诗银 张惠中 等
• 机 构: 第四军医唐都医院耳鼻喉科,第四军医大学唐都医院全骨肿瘤研究所
• 出 处: 中国现代医学杂志
• 发表日期: 2002年8期
• 关键词: HSV-TK基因 肿瘤坏死因子-α 融合基因 表达 Hsv-tk Gene Tumor Necrosis Factor Alpha Fusion Gene
• 基金项目: 国家自然科学基金资助 (批准号 39970 788)

目的：构建pEGFP-TK-TNF-α表达载体，观察其在喉癌细胞Hep-2中的瞬时表达，方法：应用PCR方法对各自的进行扩增并经测序载体pGEM-T-Easy测序，利用逆转录病毒载体PLXSN中的多克隆位点将二者融合为融合基因TK－rhTNF-α并将其亚克隆至pEGFP-N3的EcoRI和BamHI位点间成功构建表达载体pEGFP-TK-rhTNF-α，并在该载体转染人喉细胞Hep-2后观察融合蛋白表达情况，结果：酶切鉴定证实TK－rhTNF-α融合基因片段已克隆到pEGFP-N3的EcoRI和BamHI