应用随机引物法制备32P标记的HBV DNA探针

• 作 者: 吕凌 姚集鲁 彭文伟
• 机 构: 中山医科大学附属第三医院传染病科，广州 510630,中山医科大学附属第三医院传染病科，广州 510630,中山医科大学附属第三医院传染病科，广州 510630
• 出 处: 中华实验和临床病毒学杂志
• 发表日期: 1992年06期
• 关键词: 随机引物 缺口翻译 乙型肝炎病毒 脱氧核糖核酸

应用随机引物标记方法制备³²P标记的乙型肝炎病毒（HBV）DNA探针，并与缺口翻译法制备探针进行了相互比较。经液闪测定随机引物法探针比放为1 × 10⁹cpm/Hg，³²P掺入率为71.43%；缺口翻译法探针比放为1.33 × 10⁷cpm/μg，³²P掺入率为22.07%。将这两种探针用于尼龙膜载样斑点杂交，探针加量均按5 × 10⁶cpm/100cm²进行。结果随机引物探针检出HBV DNA为0.2pg，30例HBsAg和HBeAg双阳性血清中检出HBV DNA26例。同样条件下，缺口翻译探针检出HBV DNA为1pg，30例同样血清中检出HBV DNA25例。此外，随机引物探针还有杂交结果清晰，显影时间短的优点。