【摘 要】
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通过MTT、流式细胞计数、qRT-PCR等方法,研究不同来源桑黄粗多糖对肝癌细胞HepG2的抑制作用,并探讨其作用机制.结果 发现,来源于不同地区、不同寄主桑黄子实体粗多糖对肝癌细
【机 构】
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浙江省农业科学院蚕桑研究所,杭州,310021;海宁市经济作物技术服务站,浙江嘉兴,314400
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通过MTT、流式细胞计数、qRT-PCR等方法,研究不同来源桑黄粗多糖对肝癌细胞HepG2的抑制作用,并探讨其作用机制.结果 发现,来源于不同地区、不同寄主桑黄子实体粗多糖对肝癌细胞HepG2的增殖抑制作用差异显著,其中采自四川攀枝花紫油树(SH8)、福建未知树种(SH12)上的桑黄子实体粗多糖对HepG2有一定的促增殖作用;但大多数桑黄子实体粗多糖对HepG2有抑制作用,且随多糖浓度的增加抑制作用增强.采自新疆阿克苏桑树(SH1)桑黄子实体粗多糖(800 μg/mL)对HepG2细胞的增殖抑制率高达50.53％,并影响HepG2细胞周期各时相的分布,G0/G1期细胞比率从58.54％±2.61％降低至34.95％±4.50％,S期细胞比率从27.27％±1.73％升高至62.16％±3.12％,G2/M期细胞比率从14.19％±0.88％降低至2.89％±1.97％;凋亡结果显示,SH1粗多糖(800 μg/mL)作用48 h后,早期凋亡细胞比率从正常组0.26％±0.09％提高至8.81％±0.48％,晚期凋亡细胞比率从正常组0.26％±0.11％提高至51.75％±2.82％,坏死细胞比率由正常组0.89％±0.07％提高至17.01％±1.29％;qRT-PCR结果显示,SH1粗多糖处理后细胞内周期调控相关蛋白P21、P27、P57、Cyclin A、Cyclin B、Cyclin D、Cyclin E、CDK1、CDK3和CDK4在mRNA水平表达显著上调,CDK2表达显著下调;凋亡相关基因Bcl-XS、Bad、Bax、Bid和Bcl-2的表达水平也显著升高.结果 表明,桑黄粗多糖通过调控激活Cyclin A-CDK3、Cyclin E-CDK3、CyclinD-CDK4复合物促进HepG2细胞由G1期进入S期,抑制Cyclins-CDK2复合物诱导HepG2细胞S期阻滞,同时上调促凋亡蛋白基因Bcl-XS、Bad、Bax、Bid的表达,诱导细胞凋亡.
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