【摘 要】
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目前,针对甘蔗黑穗病菌与赤腐病菌单个病菌检测体系已相继建立,但是仍然未见两个病原菌的双重PCR检测方法。在本研究中,根据黑穗病菌交配型b E基因、甘蔗赤腐病菌特异性SCAR
【机 构】
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农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室/省部共建国家重点实验室培育基地—海南省热带作物栽培生理学重点实验室/农业部儋州热带作物科学观测实验站,中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业部热带农林
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目前,针对甘蔗黑穗病菌与赤腐病菌单个病菌检测体系已相继建立,但是仍然未见两个病原菌的双重PCR检测方法。在本研究中,根据黑穗病菌交配型b E基因、甘蔗赤腐病菌特异性SCAR片段序列的特异性引物,在二者单一PCR检测体系的基础上,建立并优化可同时检测黑穗病菌和赤腐病菌的双重PCR检测方法。建立的双重PCR检测体系可从黑穗病菌与赤腐病菌样品中分别扩增出320 bp和442 bp的特异条带。灵敏度分析结果表明,对混合模板黑穗病菌与赤腐病菌的最低检测水平量均为0.1ng。
At present, the detection system for the single pathogen of pathogen Sugarcane and pathogen has been established, but there is still no double PCR detection method for the two pathogens. In this study, based on the single PCR detection system based on the specific primers of mating type b E gene and the specific SCAR fragment of Candida krylovii, Double PCR method for detection of pathogen. The established dual PCR detection system can amplify specific bands of 320 bp and 442 bp from the samples of the pathogenic bacteria and the pathogenic fungi. The results of sensitivity analysis showed that the minimum detectable levels of the two combinations were 0.1 ng.
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