绿荧光蛋白基因在猪霍乱沙门氏菌C500株asd^-缺失株平衡致死载体系统中的表达

• 作 者: 徐引弟 郭爱珍 刘维红 贾爱卿 陈焕春
• 机 构: 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北省预防兽医学重点实验室
• 出 处: 中国兽医学报
• 发表日期: 2007年4期
• 关键词: 猪霍乱沙门氏茵C500株 asd^-缺失株 绿荧光蛋白表达 Salmonella choleraesuis C500 strainasd^- deleted s
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目（30571386）,湖北省科技攻关计划资助项目（2006AA205A02）,中国教育部留学回国人员科研基金资助项目

猪霍乱沙门氏菌C500株是用化学方法致弱用于预防仔猪副伤寒病的弱毒疫苗株，毒力弱且免疫原性良好。为将猪霍乱沙门氏菌开发为适于粘膜免疫的疫苗活载体并保持原有免疫原性，构建了以C500为亲本菌，用负向选择的重组自杀性质粒介导接合转移的方法构建了无抗性标记的asd^-缺失株。首先构建asd（天冬氨酸β-半乳糖脱氢酶）基因缺失1408bp的带有蔗糖敏感基因sacB的重组自杀性质粒，与C500接合转移，两步法筛选无抗性的asd^-缺失株，通过PCR鉴定。该缺失株在无外源DAP（二氨基庚二酸）条件下溶菌死亡，它的生长