hOPG基因启动子驱动报告基因LacZ的转基因小鼠模型的建立

• 作 者: 许勇 项佑贵 严兰珍 王龙 徐国江 费俭 傅继粱
• 机 构: 上海第二医科大学医学遗传学教研室,上海南方模式生物研究中心
• 出 处: 中国生物工程杂志
• 发表日期: 2005年11期
• 关键词: 人类骨保护素 启动子 报告基因 转基因小鼠 hOPG Promoter Reporter gene Transgenic mice
• 基金项目: 新材料领域项目，上海市科技发展基金

目的:建立带有人类骨保护素OPG基因启动子驱动报告基因LacZ的转基因小鼠模型,为OPG体内转录水平的表达调控研究和药物筛选创造条件.方法:将克隆到的人类OPG基因5'端上游6.0kb非翻译序列作为启动子,大肠杆菌编码β-半乳糖苷酶的LacZ基因作为报告基因,构建表达载体pCI-Neo-OPG-LacZ.经显微操作注射到受精卵原核中,经PCR以及Southern印迹杂交鉴定转基因阳性小鼠;用RT-PCR分析LacZ在组织中的表达;利用邻硝基苯-β-D-半乳吡喃糖苷(ONPG)作为底物反应后比色分析