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摘要：消化酶活性是反映鱼类消化机能的重要生理指标，鱼类消化酶活性的高低决定着鱼类对营养物质消化吸收的能力，因而消化酶活性的研究可为人工配合饲料的研制提供科学的理论依据，此外，它还可以为改善鱼类饲养方法、提高产量、制定鱼类合理饲养策略、降低养殖成本提供必要的基础资料。随着鱼类养殖业的迅速发展和生理生化的研究进展，国内外对鱼类主要消化酶的研究也取得了进一步的发展，国外对鱼类消化酶的研究比较早，1940年获得了第一个鱼胃蛋白酶的结晶，后来先后报道了野鲮、蟾胡子鲶、叉尾鲶、狗鱼拟鲤等鱼类消化酶消化性的研究情况。国内对这方面研究的起步比较晚，但也取得了不少的成果，如：吉林农大的周景祥教授等人研究了大眼狮鲈淀粉酶，郭善军教授等人研究了团头鲂等三种鱼的淀粉和蛋白酶的活性。本文选择北方养殖的团头鲂做研究对象，研究它的消化器官中淀粉酶和蛋白酶最适pH值和活性强度。
关键词：团头鲂；消化器官淀粉酶活性；研究
中图分类号：S963 文献标识码：A 文章编号：1674-0432（2012）-07-0042-1
1 材料和方法
试验用团头鲂购于活鱼市场，共4条，均为一龄鱼。
2 方法
2.1 酶粗提物的制备
活鱼运回后，测体长、体重等，杀死后置于碎冰解剖盘中解剖，取出肝胰脏，胃，肠，脾脏，用冷却去离子水冲洗内容物，将肠分为前中后三段（因为团头鲂为无胃鱼类，所以前肠代替部分胃的功能），将团头鲂肝胰脏、胃、中肠、后肠分别合并，用分析天平称重，然后加入样品重10倍的冷却去离子水在匀浆器中匀浆，然后在10000r/min的离心机中离心8min，取上清液置于4℃以下冰箱中保存，24h内分析完毕。
2.2 淀粉酶活力的测定
2.2.1 活力测定原理 碘——淀粉比色法：淀粉经一定粉酶催化水解成麦芽糖及糊精，在底物淀粉已知且过量的条件下，反应后加入碘液与未被催化水解的淀粉结合成蓝色复合物，其蓝色的深浅与未经酶促反应的空白管比较成比例。从而计算出淀粉的量，推算出淀粉酶活力。
2.2.2 最适pH测定 用磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲溶液，设置pH值为2.0、2.2、2.4、2.6、2.8、3.0、3.2、3.4、3.6、3.8、4.0、4.4、4.8、5.2、5.6、6.0、6.4、6.8、7.2、8.0.设置温度40℃，每个pH设计两个平行组，在恒温水浴中控制温度。
2.2.3 活力的计算 淀粉酶活力=(Ab-Au)/Ab×0.4×(30÷7.5)×组织稀释倍数
式中：Ab=空白管吸光度，Au=测定管的吸光度。淀粉酶活性定义：1mL酶滤液中的酶，在40℃和底物淀粉作用30min,水解10mg淀粉为1个淀粉酶活性单位。
2.2.4 测定步骤 取4支试管（其中1支为空白对照管，3支为平行测定管）分别加入底物缓冲液1mL（0.4g/L淀粉溶液），然后按所测的pH值再分别加入1mL不同梯度的pH溶液于40℃水浴5min。在测定管中加入0.4mL酶粗提物（内脏匀浆上清液）于40℃水浴7.5min。在空白管中加入1mL碘稀释液（0.1mol/L）和5.2mL去离子水，最后在722分光光度计波长在660nm比色，并通过公式计算其酶活力。
3 结果
在不同pH下团头鲂各消化器官淀粉酶活力。在pH为2.0-8.0范围之内，团头鲂各消化器官淀粉酶最适pH分别为：肝胰脏为6.4，中肠为6.4，后肠为7.2，胃为6.8，脾脏为7.2，各消化器官淀粉酶活性在肝胰脏中最强，脾脏中也较强，而在胃中最弱。
在最适合pH下团头鲂各消化器官淀粉酶活力为：肝胰脏为60.0，脾脏为58.21，胃为40.63，前肠为40.00，后肠为41.12。
4 讨论
团头鲂各消化器官中淀粉酶活力最强的是肝胰脏，活力最弱的是中肠，在脾脏中淀粉酶的活力也较强，后肠和胃中淀粉酶的活力则相对较弱。因此可以推测团头鲂消化器官中，肝胰脏和脾脏为主要的淀粉酶分泌器官，而胃和肠起辅助消化淀粉的作用，但有报道指出脾脏的功能并非分泌淀粉酶，其具有一定的淀粉酶只是因为脾脏中弥散分布着一定肝胰脏组织，所以它的淀粉酶活力也较高，这与本实验的结果是基本相符的。
作者简介：王铁彦（1955-）男，中专 就職于吉林省亮甲山水库管理局，从事水产养殖工作；尤新智（1962-）男，中专，就职于蛟河市水产技术推广站，从事水产技术推广工作。
关键词：团头鲂；消化器官淀粉酶活性；研究
中图分类号：S963 文献标识码：A 文章编号：1674-0432（2012）-07-0042-1
1 材料和方法
试验用团头鲂购于活鱼市场，共4条，均为一龄鱼。
2 方法
2.1 酶粗提物的制备
活鱼运回后，测体长、体重等，杀死后置于碎冰解剖盘中解剖，取出肝胰脏，胃，肠，脾脏，用冷却去离子水冲洗内容物，将肠分为前中后三段（因为团头鲂为无胃鱼类，所以前肠代替部分胃的功能），将团头鲂肝胰脏、胃、中肠、后肠分别合并，用分析天平称重，然后加入样品重10倍的冷却去离子水在匀浆器中匀浆，然后在10000r/min的离心机中离心8min，取上清液置于4℃以下冰箱中保存，24h内分析完毕。
2.2 淀粉酶活力的测定
2.2.1 活力测定原理 碘——淀粉比色法：淀粉经一定粉酶催化水解成麦芽糖及糊精，在底物淀粉已知且过量的条件下，反应后加入碘液与未被催化水解的淀粉结合成蓝色复合物，其蓝色的深浅与未经酶促反应的空白管比较成比例。从而计算出淀粉的量，推算出淀粉酶活力。
2.2.2 最适pH测定 用磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲溶液，设置pH值为2.0、2.2、2.4、2.6、2.8、3.0、3.2、3.4、3.6、3.8、4.0、4.4、4.8、5.2、5.6、6.0、6.4、6.8、7.2、8.0.设置温度40℃，每个pH设计两个平行组，在恒温水浴中控制温度。
2.2.3 活力的计算 淀粉酶活力=(Ab-Au)/Ab×0.4×(30÷7.5)×组织稀释倍数
式中：Ab=空白管吸光度，Au=测定管的吸光度。淀粉酶活性定义：1mL酶滤液中的酶，在40℃和底物淀粉作用30min,水解10mg淀粉为1个淀粉酶活性单位。
2.2.4 测定步骤 取4支试管（其中1支为空白对照管，3支为平行测定管）分别加入底物缓冲液1mL（0.4g/L淀粉溶液），然后按所测的pH值再分别加入1mL不同梯度的pH溶液于40℃水浴5min。在测定管中加入0.4mL酶粗提物（内脏匀浆上清液）于40℃水浴7.5min。在空白管中加入1mL碘稀释液（0.1mol/L）和5.2mL去离子水，最后在722分光光度计波长在660nm比色，并通过公式计算其酶活力。
3 结果
在不同pH下团头鲂各消化器官淀粉酶活力。在pH为2.0-8.0范围之内，团头鲂各消化器官淀粉酶最适pH分别为：肝胰脏为6.4，中肠为6.4，后肠为7.2，胃为6.8，脾脏为7.2，各消化器官淀粉酶活性在肝胰脏中最强，脾脏中也较强，而在胃中最弱。
在最适合pH下团头鲂各消化器官淀粉酶活力为：肝胰脏为60.0，脾脏为58.21，胃为40.63，前肠为40.00，后肠为41.12。
4 讨论
团头鲂各消化器官中淀粉酶活力最强的是肝胰脏，活力最弱的是中肠，在脾脏中淀粉酶的活力也较强，后肠和胃中淀粉酶的活力则相对较弱。因此可以推测团头鲂消化器官中，肝胰脏和脾脏为主要的淀粉酶分泌器官，而胃和肠起辅助消化淀粉的作用，但有报道指出脾脏的功能并非分泌淀粉酶，其具有一定的淀粉酶只是因为脾脏中弥散分布着一定肝胰脏组织，所以它的淀粉酶活力也较高，这与本实验的结果是基本相符的。
作者简介：王铁彦（1955-）男，中专 就職于吉林省亮甲山水库管理局，从事水产养殖工作；尤新智（1962-）男，中专，就职于蛟河市水产技术推广站，从事水产技术推广工作。