【摘 要】
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目的原核表达、纯化抗人cyclin D1人源单链抗体（AD9）并对其活性进行分析。方法将含有AD9基因片段的噬菌粒转化大肠杆菌HB2151后,IPTG诱导表达,ELISA鉴定培养上清具有与cyclin D
【机 构】
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分子酶学工程教育部重点实验室（吉林大学）,吉林大学第一医院儿科,吉林大学中日联谊医院神经外科
【基金项目】
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基金项目：国家自然科学基金青年基金资助项目（30200256）,吉林省科技发展计划资助项目（20050410-3）,吉林省杰出青年基金（200600107）
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目的原核表达、纯化抗人cyclin D1人源单链抗体（AD9）并对其活性进行分析。方法将含有AD9基因片段的噬菌粒转化大肠杆菌HB2151后,IPTG诱导表达,ELISA鉴定培养上清具有与cyclin D1蛋白结合活性后,经硫酸铵沉淀,His Trap HP亲和纯化,获得抗人cyclin D1人源单链抗体（AD9）,进一步利用ELISA和Western blot对其进行鉴定和活性分析。结果IPTG诱导AD9可溶性表达,培养上清经硫酸铵沉淀和亲和纯化后,获得纯度达95%的单链抗体蛋白,ELISA和Weste
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