高亲和力大豆凝集素单抗制备及免疫学特性鉴定

• 作 者: 胡骁飞 李燕虹 邢云瑞 胡思宇 孙亚宁 邢广旭 邓瑞广 张改
• 机 构: 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,河南科技大学食品与生物工程学院,河南农业大学生命科学学院,河南农业大学牧医工程学院
• 出 处: 核农学报
• 发表日期: 2020年11期
• 关键词: 大豆凝集素(SBA) 动物免疫 细胞融合 杂交瘤筛选 单克隆抗体 soybean agglutinin(SBA)animal immunizationcell
• 基金项目: “十二五”国家科技支撑计划课题(2014BAD13B05),中国博士后科学基金(2018M632778)

为制备高亲和力的大豆凝集素(SBA)单克隆抗体,本试验以50μg SBA蛋白/200μL乳化液/只的剂量免疫BALB/c小鼠,间接ELISA和间接竞争ELISA鉴定多抗血清效价和灵敏性。选择血清效价和灵敏性较好的小鼠进行细胞融合。通过有限稀释亚克隆筛选出能稳定分泌SBA单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株。采用体内诱生腹水法批量制备SBA单克隆抗体并对其免疫学特性进行鉴定。结果表明,SBA免疫的4只小鼠中,1号小鼠效价最高且灵敏性最好,半数抑制浓度(IC50)为571.4μg·L^-1。选取该小鼠进行细