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目的 观察针对hTERT基因的短发夹状RNA(shRNA)表达载体pSilencer-hTERT对人肾癌细胞及移植瘤生长的抑制作用.方法 (1)pSilencer-hTERT转染人肾癌Ketr-3细胞,1、3、5、7d后逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白印迹技术检测hTERT mRNA、蛋白表达,MTT法检测细胞增殖,原位末端标记法检测凋亡.(2)BALB/C-nu裸鼠接种Ketr-3细胞成瘤,瘤内分别注射pSilencerhTERT(50 μg)、空质粒pSilencer1.0-U6(50 μg)及等体积(100 μl)生理盐水,隔日1次,共7次.治疗结束后第3天处死小鼠,取瘤组织检测肿瘤体积,免疫组织化学染色检测hTERT表达.结果 (1)pSilencer-hTERT转染3d后Ketr-3细胞hTERT mRNA表达(43.2±4.4)%、蛋白表达(42.6±5.6)%最低,细胞增殖抑制率(37.3±6.6)%、凋亡细胞阳性率(30.5±4.7)%最高,分别与空质粒对照组[(98.8±4.7)%、(98.0±3.7)%、(3.3±0.9)%、(10.4±2.4)%]比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).(2)pSilencer-hTERT处理组小鼠肿瘤体积(62.4±36.5)mm3减小,hTERT表达率(65.7±4.7)%降低,分别与空质粒对照组(83.2±38.7)、(90.7±4.2)%比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 pSilencer-hTERT能有效、持续抑制人肾癌Ketr-3细胞及裸鼠肾癌移植瘤生长。