【摘 要】
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目的 探讨晚期糖基化产物(AGEs)诱导人血管平滑肌细胞(HVSMCs)发生收缩-合成表型转化的分子机制及苦参素的抑制作用.方法 将HVSMCs分为对照组(control)、低剂量AGEs组(L-AGEs)、高剂量AGEs组(H-AGEs)、低剂量苦参素组(AGEs+L-Mat)、中剂量苦参素组(AGEs+M-Mat)以及高剂量苦参素组(AGEs+H-Mat).免疫荧光法评估HVSMCs平滑肌肌球蛋白重链11(MYH11)表达水平.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液白介素(IL)1β及肿瘤坏
【机 构】
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陕西中医药大学第二临床医学系内科教研室,西安712046;陕西省人民医院心血管内科;延安大学医学院内科学系
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目的 探讨晚期糖基化产物(AGEs)诱导人血管平滑肌细胞(HVSMCs)发生收缩-合成表型转化的分子机制及苦参素的抑制作用.方法 将HVSMCs分为对照组(control)、低剂量AGEs组(L-AGEs)、高剂量AGEs组(H-AGEs)、低剂量苦参素组(AGEs+L-Mat)、中剂量苦参素组(AGEs+M-Mat)以及高剂量苦参素组(AGEs+H-Mat).免疫荧光法评估HVSMCs平滑肌肌球蛋白重链11(MYH11)表达水平.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液白介素(IL)1β及肿瘤坏死因子(TNF)α浓度.Western blotting法检测HVSMCs内葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、Notch受体细胞内结合域1(NICD1)、Split多毛增强子1(HES1)、发状分裂相关增强子2(HEY2)、δ样蛋白-4(Dll4)表达水平及蛋白激酶RNA样内质网激酶(PERK)磷酸化水平.结果 与control组相比,L-AGEs组及H-AGEs组HVSMCs中MYH11表达水平显著降低(P<0.05),细胞内GRP78、Dll4、NICD1、HES1、HEY2表达水平及PERK磷酸化水平显著升高(均P<0.05),细胞培养上清液IL-1β及TNF-α浓度显著升高(均P<0.05).与L-AGEs组相比,H-AGEs组细胞MYH11、GRP78、Dll4、NICD1、HES1、HEY2表达水平及PERK磷酸化水平均显著升高(均P<0.05),细胞培养上清液IL-1β及TNF-α浓度均显著升高(均P<0.05).与H-AGEs组相比,AGEs+L-Mat组、AGEs+M-Mat组及AGEs+H-Mat组MYH11表达水平显著升高(P<0.05),细胞内GRP78、Dll4、NICD1、HES1、HEY2表达水平及PERK磷酸化水平显著降低(均P<0.05),细胞培养上清液IL-1β及TNF-α浓度显著降低(均P<0.05);AGEs+L-Mat组、AGEs+M-Mat组以及AGEs+H-Mat组细胞MYH11、GRP78、Dll4、NICD1、HES1、HEY2表达水平及PERK磷酸化水及细胞培养上清液IL-1β 及TNF-α 浓度变化具有显著的苦参素剂量依赖性(均P<0.05).结论 AGEs通过激活内质网应激PERK/Notch信号通路诱导HVSMCs发生收缩-合成表型转化,苦参素能够通过抑制该通路活化阻遏AGEs诱导的VSMCs表型转化.
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