【摘 要】
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为建立快速、简便检测H3N2亚型禽流感病毒(AIV)的方法,根据H3和N2亚型AIV HA、NA基因保守序列,分别设计筛选了特异性引物和用不同荧光基团标记的TaqMan探针.通过优化反应条件
【机 构】
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广西师范大学生命科学学院,广西桂林,541004广西壮族自治区兽医研究所,广西畜禽疫苗新技术重点实验室,广西南宁530001;
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为建立快速、简便检测H3N2亚型禽流感病毒(AIV)的方法,根据H3和N2亚型AIV HA、NA基因保守序列,分别设计筛选了特异性引物和用不同荧光基团标记的TaqMan探针.通过优化反应条件,建立了H3N2亚型AIV双重实时荧光定量RT-PCR检测方法.结果显示该法特异性强,不与其他亚型AIV和常见禽病病原体发生交叉反应,敏感性达100拷贝/μL;组内组间重复性好,平均变异系数均小于3％;应用该法对96份临床样品检测,结果与病毒分离鉴定结果一致.表明本研究建立的H3N2亚型AIV双重实时荧光定量RT-PCR具有快速、特异、敏感、重复性好等优点,可用于H3N2亚型AIV的快速诊断和监测.
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