【摘 要】
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目的用含防御素HNP-3成熟肽cDNA片段构建酵母双杂交诱饵质粒,进行自激活和毒性检测。方法培养HL-60细胞,提取RNA,RT-PCR扩增含防御素HNP-3成熟肽的cDNA片段,克隆入pBlue-script-S
【机 构】
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四川大学华西医学中心基础医学与法医学院免疫教研室,四川大学华西医院麻醉科
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(3040763,30671963)
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目的用含防御素HNP-3成熟肽cDNA片段构建酵母双杂交诱饵质粒,进行自激活和毒性检测。方法培养HL-60细胞,提取RNA,RT-PCR扩增含防御素HNP-3成熟肽的cDNA片段,克隆入pBlue-script-SK-Ⅱ质粒,经测序鉴定后,再亚克隆到人酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,PCR及测序鉴定。重组诱饵质粒用缺陷培养基筛选方法进行自激活和毒性检测。结果构建的重组质粒pBluescript-SK-Ⅱ-HNP-3,经测序鉴定,插入片段为HNP-3成熟肽的cDNA序列。亚克隆构建的重组诱饵质pGBKT7
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