重组绿脓杆菌外膜蛋白OprF的表达、纯化及多克隆抗体制备与鉴定

• 作 者: 陈春琳 刘祥 俱雄
• 机 构: 陕西理工学院生物科学与工程学院
• 出 处: 生物技术通报
• 发表日期: 2015年8期
• 关键词: OprF蛋白 多克隆抗体 酶联试验 Western BLOTTING 系统发生分析 OprF protein polyclonal antibody E
• 基金项目: 陕西省教育厅科学研究计划（2013JK0723）,陕西理工学院人才启动项目（SLGQD13-15）

绿脓杆菌外膜蛋白Opr F可有效激活机体的免疫机制对抗细菌的感染,在疫苗上有很好的应用前景。采用分子克隆方法获得绿脓杆菌外膜蛋白Opr F表达菌株;利用SDS-PAGE电泳切胶纯化、尿素梯度复性获得Opr F蛋白,免疫小鼠制备Opr F蛋白多克隆抗体。ELISA法表明,Opr F抗血清滴度达1∶12 800倍,Western blotting证实抗血清具有很好的特异性。通过DNAMAN软件对Opr F序列同源性分析发现其C端在不同细菌间存在较高同源性;采用MEGA软件对Opr F的系统发生分析发现假单胞菌