【摘 要】
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<正> 聚合酶链反应(PCR)自问世以来已在生物学界、医学界等领域中得到广泛的应用.其中一个重要方面是将其产物克隆,然后测定核苷酸序列.常用的 PCR产物克隆法是将 PCR 产物以
【机 构】
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上海第二医科大学上海市免疫学研究所,上海第二医科大学上海市免疫学研究所上海200025,上海200025,上海200025
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<正> 聚合酶链反应(PCR)自问世以来已在生物学界、医学界等领域中得到广泛的应用.其中一个重要方面是将其产物克隆,然后测定核苷酸序列.常用的 PCR产物克隆法是将 PCR 产物以粘性末端或平头连接于 M13噬菌体或 pUC 质粒中,然后转染大肠杆菌.粘性末端连接克隆法效率高,但需在 PCR 产物两端有特定的限制性内切酶切点.且在酶切时易受到多种因素影响而不能得到理想的产物,平头连接克隆法无须酶切,可适用于任何 PCR 产物,但缺点是效率低,笔者在国外工作期间,将平头连接法进行了改进,得到了令
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