【摘 要】
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目的:鉴定RINm5F细胞中环加氧酶-2(COX-2)启动子区-649/-638转录抑制元件的关键位点及细胞特异性。方法:在RINm5F细胞中,利用荧光素酶报告载体,检测特定位点(-649/-646、-645
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目的:鉴定RINm5F细胞中环加氧酶-2(COX-2)启动子区-649/-638转录抑制元件的关键位点及细胞特异性。方法:在RINm5F细胞中,利用荧光素酶报告载体,检测特定位点(-649/-646、-645/-642、-641/-638)突变后启动子活性的改变;通过电泳迁移率转变实验,观察上述位点突变后与细胞核蛋白结合能力的改变。在另外两种细胞系(INS-1、CHO细胞)中,利用荧光素酶报告载体,检测野生型和突变型(-649/-638突变)COX-2的启动子活性。结果:RINm5F中,抑制元件位点-649/-646、-645/-642突变使启动子活性显著上升,与核蛋白结合能力降低。INS-1、CHO细胞中,野生型和突变型启动子活性无显著差异。结论:转录抑制元件的关键位点为-649/-642,此元件具有细胞特异性,可为中医药干预COX-2异常疾病提供明确的作用靶标。
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