【摘 要】
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骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,b MSCs)具有自我更新、支持造血、多向分化和低免疫原性等特点,在调控树突状细胞(dendritic cells,DCs)成熟的过程中
【机 构】
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重庆医科大学附属第一医院血液内科; 天津医科大学肿瘤医院血液肿瘤科国家肿瘤临床医学研究中心天津市肿瘤防治重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(No.81670102)资助~~
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骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,b MSCs)具有自我更新、支持造血、多向分化和低免疫原性等特点,在调控树突状细胞(dendritic cells,DCs)成熟的过程中发挥重要作用。为了探讨b MSCs调控DCs成熟的机制,本研究通过分离培养正常捐献者b MSCs,并分离获取外周静脉血单个核细胞,诱导未成熟的树突状细胞(immature dendritic cells,im DCs)和成熟的树突状细胞(mature dendritic cells,m DCs)生成。根据Genebank中人STAT3全长基因序列,设计针对STAT3的siRNA。根据培养条件不同设计实验分组:正常b MSCs与im DCs共培养(阴性对照组),转染siRNA的b MSCs与im DCs共培养(siRNA组)、加入JAK/STAT通路抑制剂AG490的b MSCs与im DCs共培养(AG490组)、加入TNF-α诱导的m DCs(阳性对照组)共4组,共培养72 h,流式细胞术分析DCs表型变化,ELISA检测培养液上清中IL-12水平变化。结果显示,阴性对照组不表达CD40、CD80、CD83、CD86和HLA-DR标志树突细胞成熟的分子,而表达CD11 b,其表型与im DCs一致;而siRNA组和AG490组的DCs表达CD40、CD80、CD83、CD86和HLA-DR等标志分子,而不表达CD11 b,其表型与TNF-α诱导成熟的m DCs表型一致;siRNA组、AG490组和阳性对照组的IL-12水平较阴性对照组的IL-12水平显著升高(P<0.05),但siRNA组、AG490组和阳性对照组之间无明显差异(P>0.05)。以上结果表明,通过siRNA和抑制剂AG490阻断b MSCs中JAK/STAT3通路促进了im DCs的成熟,提示b MSCs通过JAK/STAT3通路参与调控im DCs成熟。
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