【摘 要】
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背景:目前从大鼠骨髓中分离骨髓间充质干细胞仍以密度梯度离心法为主,虽可提取较纯的骨髓间充质干细胞,但步骤较繁琐,容易污染,且较昂贵。目的:试图寻找一种经济、方便及可靠
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背景:目前从大鼠骨髓中分离骨髓间充质干细胞仍以密度梯度离心法为主,虽可提取较纯的骨髓间充质干细胞,但步骤较繁琐,容易污染,且较昂贵。目的:试图寻找一种经济、方便及可靠的骨髓间充质干细胞提取方法。设计、时间及地点:以细胞为对象的对比观察实验,于2008-02/04在南方医科大学珠江医院中心实验室完成。材料:10只健康SD大鼠一侧前后肢提取出的骨髓间充质干细胞为实验组,另一侧前后肢提取出的骨髓间充质干细胞为对照组。方法:将实验组骨髓在含体积分数为0.10～0.15的胎牛血清、100IU/mL双抗及0.1%hepes液的DMEM培养基中培养,用注射器进行吹打,使骨髓与培养基充分混匀,吸取混合液,通过200目的筛网滤过后将其置于培养瓶中培养,提取较纯的骨髓间充质干细胞,对照组采用传统的密度梯度离心法提取骨髓间充质干细胞。主要观察指标:传代至第3代时,采用流式细胞仪鉴定提取的细胞,并从形态及数量上比较两种方法提取的细胞差异。结果:两种方法提取的骨髓间充质干细胞形态无明显差别,流式细胞仪检测通过改良法提取的细胞CD29+、CD44+、CD45-,可鉴定为骨髓间充质干细胞。两组间骨髓间充质干细胞数量无明显差异(P>0.05)。结论:实验采用的改良提取方法具有经济、操作简便等特点,是较为理想的大鼠骨髓间充质干细胞提取方法。
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