【摘 要】
：
为制备伪狂犬病病毒变异株gE蛋白的单克隆抗体,PCR扩增伪狂犬病病毒gE蛋白主要抗原表位区的基因片段,并将其克隆至原核表达载体p Cold-TF。经1 mmol/L IPTG低温诱导,表达了约
【机 构】
：
中国农业科学院上海兽医研究所; 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;
【基金项目】
：
上海市闵行区人才发展专项基金;上海市自然科学基金项目(14ZR1448900);上海市科技兴农重点攻关项目(沪农科攻字(2015)第1-7号,沪农科攻字(2016)第4-2号);国家生猪现代产业技术体系项目(CARS-36)
论文部分内容阅读
为制备伪狂犬病病毒变异株gE蛋白的单克隆抗体,PCR扩增伪狂犬病病毒gE蛋白主要抗原表位区的基因片段,并将其克隆至原核表达载体p Cold-TF。经1 mmol/L IPTG低温诱导,表达了约90 k Da的gE融合蛋白。融合蛋白用镍离子金属亲和层析柱纯化后,免疫6周龄BALB/c雌性小鼠,经细胞融合和筛选,获得了2株稳定分泌抗gE蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞(5B2和6E6)。间接免疫荧光试验(indirect immunofl uorescence assay,IFA)显示2株单克隆抗体均能与PRV变异株(JS-2012)反应,但与gE缺失的疫苗毒Bartha-K61株无反应。Western blot结果显示5B2和6E6与gE蛋白不反应,提示2株单克隆抗体针对的可能是gE蛋白的构象表位。本研究获得的gE蛋白单克隆抗体为伪狂犬病病毒变异株的鉴定与功能研究以及野毒株和疫苗株的鉴别诊断提供了良好的工具。
其他文献
组织公共财产收入、分配公共财产是财税法最主要的功能,宏观调控是现代国家赋予财税法的一项补充功能。考察不同历史时期、不同财政类型的财政调控功能的演进,分析现代市场经
在教学的过程中，不能够让学生变成死读书的学习机器，而是要让学生读活。在文中则是从语文教学出发，就如何有效利用语文教材将学生教活进行分析探讨。
随着科技的发展、社会的要求,多媒体教学已经成为教师课堂教学必不可少的工具。本文通过将多媒体教学与传统课堂教学对比,总结出多媒体教学的诸多优点,又客观地列举了多媒体
<正>母猪便秘发生率很高,主要体现就是母猪肠道内容物停滞,肠肌把水分吸收造成干燥,从而使肠道阻塞的一种疾病,引起这种疾病的原因很多,如饲料搭配不合理,母猪运动量不够,饲
在大众创业、万众创新上升为国家战略的今天,高校众创空间作为新型创业孵化载体和创新创业教育实践平台,在政策环境和资源集聚的催化下,如雨后春笋一般得到迅速发展。在经历
当代建筑技术美学是在人文基点上研究人、技术和自然之间审美关系的一门学科。它并非美学简单地应用于技术,而是在更深层次上关注人类在实践活动中对技术非人性化的遏制,将人