乙型肝炎病毒X基因在大肠杆菌中亚克隆与鉴定

来源 :中国公共卫生学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jackydu

【摘要】

：

用ＨｐａＩ和Ｂｇ１Ⅱ双酶切３．２ｋｂＨＢＶＤＮＡ，得到近１．１ｋｂ大小的完整ＨＢｘ基因，利用绿豆芽核酸酶将ＨＢｘ基因、载体ｐＢＲ３２２的ＢａｍＨＩ酶切粘性末端切成平末端，在Ｔ４ＤＮＡ连接酶作用下进行体外重组后转化到大肠杆菌中，获得亚克隆Ｅ．ｃｏｌｉＪＭ１０９ｐＢＲ３２２－ＨＢｘ，并经药物平板筛

【作者】

：

孙峥嵘王桂珍

【机构】

：

沈阳市第六人民医院中心实验室,中国医科大学微生物学教研室

【出处】

：

中国公共卫生学报

【发表日期】

：

1998年5期

【关键词】

：

乙型肝炎病毒 HBX基因 SOUTHERN HBV HBx Southern blot Hybridization

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用ＨｐａＩ和Ｂｇ１Ⅱ双酶切３．２ｋｂＨＢＶＤＮＡ，得到近１．１ｋｂ大小的完整ＨＢｘ基因，利用绿豆芽核酸酶将ＨＢｘ基因、载体ｐＢＲ３２２的ＢａｍＨＩ酶切粘性末端切成平末端，在Ｔ４ＤＮＡ连接酶作用下进行体外重组后转化到大肠杆菌中，获得亚克隆Ｅ．ｃｏｌｉＪＭ１０９ｐＢＲ３２２－ＨＢｘ，并经药物平板筛选、电泳分析和ＤＩＧ标记的探针做Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交实验证实。Ｅ．ｃｏｌｉＪＭ１０９ｐＢＲ

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