大黄素通过线粒体通路诱导HepG2细胞凋亡

来源 :中国实验方剂学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:buynewer1111
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目的:研究大黄素对Hep G2细胞的毒性和可能的作用机制。方法:通过细胞增殖与活性检测试剂(Am-blue)测定大黄素对Hep G2细胞的毒性;使用2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)和花青染料(JC-1)探针检测细胞内活性氧与线粒体膜电位水平;使用流式细胞仪,通过磷脂结合蛋白V/碘化丙啶(Annexin V/PI)双染色试剂盒检测大黄素对Hep G2细胞凋亡的影响;通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测成熟型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3,8,9(cleaved Caspase-3,8,9)以及聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(cleaved-PARP)等凋亡相关蛋白表达。结果:与空白组比较,大黄素(15,30μmol·L-1)对Hep G2细胞具有增殖抑制作用(P<0.01),并且具有浓度依赖性;大黄素(15,30μmol·L-1)能够升高细胞内活性氧水平,并且使细胞线粒体膜电位降低(P<0.01);大黄素(15,30μmol·L-1)能够使Hep G2细胞早期和晚期凋亡增加(P<0.01);大黄素(15,30μmol·L-1)能够激活cleaved Caspases-8,9,3和PARP蛋白的表达(P<0.01)。结论:大黄素对Hep G2细胞有增殖抑制作用,说明大黄素具有潜在的肝脏毒性,其毒性作用机制是通过线粒体凋亡途径实现的。
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