铜绿假单胞菌噬菌体PaP3整合位点的鉴定

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目的:确定铜绿假单胞菌噬菌体PaP3在宿主菌基因组中的整合位点.方法:利用在噬菌体PaP3基因组中无酶切位点的Pst Ⅰ对溶原性细菌全基因组进行酶切,获得含有噬菌体PaP3全基因组及部分宿主菌DNA序列的大片段;然后进行第二次酶切,获得噬菌体基因组与宿主菌基因组的交界点序列,并进行克隆、测序,鉴定出杂合位点attR.根据λ噬菌体的整合机制,利用PCR反应扩增出另一杂合位点attL,根据测序结果及Blast检索确定attP与attB的位置和DNA序列.结果:经序列比对发现,attP及attB的核心位点分别位
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