【摘 要】
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目的:体外构建人C型利钠利尿肽(C N P,前体基因名N PPC)和增强型绿色荧光蛋白(EG FP)重组腺病毒,并检测其在兔骨髓间充干细胞(B M SC s)中的表达。方法:将N PPC基因克隆至含
【机 构】
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解放军总医院口腔科,军事医学科学院基础医学研究所,武警总医院口腔科,解放军总医院口腔正畸科
【基金项目】
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国家自然科学基金(项目编号:31170926);国家自然科学基金面上项目(项目编号:81170523);吴阶平医学基金会临床科研专项资助(项目编号:320.6750.15029)
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目的:体外构建人C型利钠利尿肽(C N P,前体基因名N PPC)和增强型绿色荧光蛋白(EG FP)重组腺病毒,并检测其在兔骨髓间充干细胞(B M SC s)中的表达。方法:将N PPC基因克隆至含有EG FP的穿梭质粒,获得重组腺病毒A d-N PPC-EG FP颗粒,测定病毒滴度。转染兔骨髓间充质干细胞,测定感染复数(M O I)值,荧光显微镜、流式细胞仪检测转染效率及传代稳定性。结果:经PC R、酶切鉴定、测序分析,重组腺病毒构建成功,效价为1.2×1011PFU/m l,转染兔B M SC s最适M O I值为1000。感染细胞后效率较高,且稳定遗传。结论:成功构建C N P基因N PPC重组腺病毒,可在兔B M SC s中稳定表达,为进一步研究C N P的作用奠定基础。
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