【摘 要】
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目的 探究小分子化合物ZK93426对小鼠和人精子获能的影响及作用机制.方法 采用蛋白质印迹技术(Western Blot)检测ZK 93426对小鼠精子和人精子获能相关的酪氨酸磷酸化的影响;
【机 构】
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上海交通大学医学院组织胚胎学与遗传发育学系,上海200025;上海市生殖医学重点实验室,上海200025
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目的 探究小分子化合物ZK93426对小鼠和人精子获能的影响及作用机制.方法 采用蛋白质印迹技术(Western Blot)检测ZK 93426对小鼠精子和人精子获能相关的酪氨酸磷酸化的影响;运用Western Blot检测ZK 93426在正常以及缺少HCO3-,BSA,Ca2+的获能缓冲液(modified Krebs-Ringer bicarbonate medium,HMB)中对获能的作用;选取精子特异钙离子通道CatSper抑制剂NNC 55-0396及PKA通路抑制剂H89进一步探索ZK93426对于精子获能的机制.结果 ZK 93426对小鼠精子和人精子获能相关蛋白酪氨酸磷酸化均有促进作用,且在缺少Ca2+的获能缓冲液中具有更明显的促进蛋白酪氨酸磷酸化作用.NNC 55-0396不会抑制ZK 93426对于获能相关的酪氨酸磷酸化的促进作用,而PKA抑制剂H89可抑制其作用.结论 ZK 93426对精子获能相关的蛋白酪氨酸磷酸化的促进作用不依赖CatSper通道,可能通过作用于PKA通路的上游发挥相应的作用.
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