【摘 要】
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运用高效液相色谱和电喷雾四极杆离子阱质谱（ＨＰＬＣ－ＥＳＩ－ＱＩＴＭＳ）联用技术鉴定了两种天然磷酸化蛋白──牛β－酪蛋白（β－ｃａｓｉｎｅ）和牛髓磷脂碱性蛋白（ｍｙｅｌｉｎｂａｓｉｃ Ｐｒｏｔｅｉｎ， ＭＢＰ）的磷酸化位点．用胰蛋白酶酶解蛋白质，高效液相色谱（ＨＰＬＣ）分离酶解
【机 构】
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中国科学院上海生物化学研究所!上海 200031;
【基金项目】
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国家自然科学基金重大资助项目!（批准号：39990600）;国家“863”高技术计划资助项目!（批准号：863－102－08－0
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运用高效液相色谱和电喷雾四极杆离子阱质谱（ＨＰＬＣ－ＥＳＩ－ＱＩＴＭＳ）联用技术鉴定了两种天然磷酸化蛋白──牛β－酪蛋白（β－ｃａｓｉｎｅ）和牛髓磷脂碱性蛋白（ｍｙｅｌｉｎｂａｓｉｃ Ｐｒｏｔｅｉｎ， ＭＢＰ）的磷酸化位点．用胰蛋白酶酶解蛋白质，高效液相色谱（ＨＰＬＣ）分离酶解肽段，电喷雾离子阱质谱（ＥＳＩ－ＩＴＭＳ）在线测定完整肽段的分子量，同时结合碰撞诱导解离（ＣＩＤ）技术获得肽段的ＭＳ／ＭＳ谱．根据测定得到的肽段分子量比预计的分子量大８０或其整倍数，判定某一肽段存在磷酸化修饰；再根据其ＭＳ／ＭＳ谱解析（人工解析或蛋白质数据库自动搜寻）肽段的序列，鉴定磷酸化位点．
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