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应用细胞混悬接种法代替单层吸附法改进了空斑技术。两种方法检测的病毒滴度和中和抗体结果均无差异。覆盖物营养层内含适量HEPES对空斑形成有促进作用。血清中和试验时中和作用温度为4℃,同时加适当补体可明显增加中和抗体的滴度。本方法空斑形成所需时间较原方法提前3～4天,试验操作简单,成功率较高,适于推广应用。