肝片吸虫组织蛋白酶L真核表达载体构建及重组蛋白活性分析

• 作 者: 闻晓波 冉旭华 王春仁 宋佰芬 魏晓曼 李晓娟 王密 苗艳
• 机 构: 黑龙江八一农垦大学动物科技学院
• 出 处: 中国人兽共患病学报
• 发表日期: 2013年1期
• 关键词: 肝片吸虫 catL基因 真核表达 活性分析 Fasciola hepatica cathepsin L-like proteases eukaryotic
• 基金项目: 黑龙江省教育厅青年骨干项目（No.1251G042）,黑龙江省科技计划项目（GZ11B208）联合资助

目的构建肝片吸虫组织蛋白酶L（CatL）的真核表达载体，研究重组蛋白的生物学活性。方法以构建好的重组质粒pET30a-FhCatL为模板，利用PCR技术扩增肝片吸虫组织蛋白酶L基因（catL），连接真核表达载体pEGFP-N1，构建重组质粒pEGFP-N1-CatL，转染HeLa细胞，荧光显微镜下观察绿色荧光，Westernblotting检测重组蛋白表达情况。结果重组质粒pEGFP-N1-CatL在HeLa细胞中获得了表达，Westernblotting结果表明真核表达质粒表达的重组蛋白能-9自然感染肝